小鼠胚胎干細胞系MESPU30 elisa試劑盒技術原理:
1、抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2、結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
3、 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
4、 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
5、此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
6、加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
試劑盒小貼士
1. 在收到試劑盒后,為保證檢測效果,需要根據說明書中保存條件正確儲存。除非特別注明,試劑盒大多是在2~8°C條件下儲存
2. 在實驗進行前,請確認包裝中的試劑盒成分與說明書一致,再進行后續(xù)操作
3. 溶解標準品過程中,注意標準品是否受潮,過程中要避免產生泡沫
4. 為了避免交叉污染,配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽
5. 每次孵育時,正確使用封板膠紙可保證結果的準確性
6. 正確洗板有助于實驗結果的穩(wěn)定性
7. TMB顯色底物在上板前應為無色,請避光保存。加入孔板后,將由無色變成不同程度的藍色
8. 終止液上板順序需與底物上板順序一致,加入終止液,溶液顏色由藍色變?yōu)椤H绻霈F綠色,即表明終止液與底物未混勻,請充分混合