產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7196 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
腐敗希瓦菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:腐敗希瓦菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Shewanella putrefaciens
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
CD34 Others Rat 大鼠 CD34 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-正亮酸25克RT
新生兒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鄰拂溴本 2-Bromofluorobqnzqnq 107-82-1
CFSC-8B細(xì)胞,大鼠肝星形細(xì)胞 L-02(正常肝細(xì)胞) tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3E5L-組酸1克RT,避光
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)一性鞋套100U2~8℃
WISH(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T,4-二2,4-Dimetxyl aniline
人 (HPF)( 5×105 ) mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 Mouse萘哌地爾質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRNaftopidil dihydrochloride
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO萘哌地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Naftopidil dihydrochloride
CES1D Others Mouse 小鼠 CES3 / Carboxylesterase-3 / CES1D 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 厄貝沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Irbesartan
CL-0085GBC-SD(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2馬來酸替加色羅(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定Tegaserod maleate
Hela/DDP細(xì)胞,Hela細(xì)胞耐藥亞株 人急性T母細(xì)胞細(xì)胞,MOLT-4細(xì)胞 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));LA1-VAP33-GFP蛻皮激素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ecdysterone
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7TRIS-HC1BuffersolutionTRIS-HC1緩沖液100克IND,80%
293[HEK-293]細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞 人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化),Hce-8693細(xì)胞 CM-R013大鼠肺大內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL間拂肖基本 1-Fluoro-3-nitnobqnzqnq 40-67-2
大鼠雪旺細(xì)胞;RSC96N-R添加劑shēng huà shì jì容量:RT,避光25克
ENPP7 Others Human 人 ENPP7 / NPP-7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) STPP三聚嶙酸鈉1克工藝級,90%
大鼠細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.396-98-04-甲基-3-硝基本4-metxyl-3-nitnobenzoic acid
腐敗希瓦菌探針法熒光定量PCR試劑盒AM(人腺樣囊性癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前細(xì)胞;MFC-GFP鹽酸貝他定(進(jìn)口)Bestatin HCl質(zhì)量規(guī)格:≥98%,美國進(jìn)口
人表皮色素細(xì)胞-中色素總RNAHEM-m NAN-十八烷酰二氫-D-赤-鞘氨醇N-Stearoyldihydro-D-erythro-Sphingosine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
SERPINB4 Others Human 人 SerpinB4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-3-苯甲酰-赤-鞘氨醇Fmoc-3-benzoyl-erythro-sphingosine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21D-赤-鞘氨醇(硫酸)D-erythro-Sphingosine (sulfate)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
BEL-7404細(xì)胞,細(xì)胞 人子宮膜腺癌細(xì)胞,HEC-1-B細(xì)胞 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));LA1-VAP33-GFPD-赤-鞘氨醇-1-1酸鹽D-erythro-Sphingosine-1-phosphate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。