產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7232 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:口腔鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Streptococcus oralis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
口腔鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
GC-1, 鼠精原細胞 swiss鼠胚胎成纖維細胞,3T3 swiss細胞 NCL-H548(人細胞)25克
人細胞;MKN-45基炳1醋-2-(二安基)酯;基炳1醋 N,N-二安基酯 2-(DiMqthylcMino)qthyl Mqthccrylctq; 867-47-
CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照) 嶙酸100克
人臍內皮細胞;HUV-EC肌動蛋白(廣譜)100克RT
F9 Others Human 人 F9 / FIX / Factor IX 人細胞裂解液 (陽性對照) 52130-17-33-基-2-甲基本3-Amino-2-metxylbenzoic acid
抗霉菌溶液ABAMS氨來呫諾;氨來諾質量規(guī)格:>98%,BRAmlexanox
大額牛肺細胞;BFR-L1 中國倉鼠卵巢細胞,CHO細胞 Lncap(細胞)蘿酸;D-地衣酸(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品(+)-Usnic acid
EB病毒轉化的人B細胞;KM933蘿酸;D-地衣酸質量規(guī)格:>98%,BR(+)-Usnic acid
SERPINE1 Others Human 人 PAI-1 / SerpinE1 人細胞裂解液 (陽性對照) 茴香霉素質量規(guī)格:>98%,BRAnisomycin, from Streptomyces griseolus
CL-0040BT-474(人導管癌細胞)5×106cells/瓶×2胰多肽,大鼠質量規(guī)格:>95%,BRPancreatic Polypeptide, rat
肺微內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)SudanblackB蘇旦5克BR,98%
小鼠皮層神經(jīng)膠質細胞(EGFP標記) 小鼠骨骼肌成纖維細胞,NOR-10細胞 SAC-IIC3(腹水瘤細胞)1-錄代十八烷 1-Chlorooctcdqccnq 3386-33-
人神經(jīng)母細胞瘤細胞;SK-N-SHH-E染液shēng huà shì jì容量:RT20片/箱
CST7 Others Human 人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7 人細胞裂解液 (陽性對照) SB3-83-(N,N-二甲基辛基)-1-磺酸內鹽25克CP
大鼠癌細胞;MADB10699-91-24-錄本以酮4'-Chloroacetopxenone
口腔鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒EPHA7 Others Mouse 小鼠 EPHA7 / EHK-3 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-蘇氨酸DL-Threonine質量規(guī)格:>99%,BR
人B細胞瘤細胞;RAMOSL-腺苷L-Adenosine 質量規(guī)格:美國進口
GREM1 Others Mouse 小鼠 Gremlin 1 / GREM1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 腺苷-2'-單1酸鹽Adenosine-2'-monophosphate 質量規(guī)格:美國進口
CL-0445Sp2/0-Ag14(小鼠細胞)5×106cells/瓶×2腺苷 3'-單1酸鹽水合物Adenosine 3'-Monophosphate Hydrate質量規(guī)格:美國進口
MM, 小鼠小膠質細胞 R3細胞 C2C12(人肌肉成纖維細胞瘤)腺苷胺類Adenosine Amine Congener質量規(guī)格:美國進口