產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7252 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
RT-豬病毒型探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:RT-豬病毒型探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Suid Herpesvirus-1(SuHV-1) I
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SF9, 昆蟲卵巢細(xì)胞 其它疊氮-赤-鞘氨醇質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Azido-erythro-sphingosine
CD19 Others Mouse 小鼠 CD19 / Leu-12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) DL-赤-二氫鞘氨醇質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口DL-erythro-Dihydrosphingosine
人滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞裂解物HVTLD-赤-二氫-D-鞘氨醇-1-1酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口D-erythro-Dihydro-D-sphingosine-1-phosphate
IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 籠形D-赤-鞘氨醇-1-1酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Caged D-erythro-Sphingosine-1-phosphate
BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞;BNL 1ME A.7R.1L-(-)-葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品L-(-)-Glucose
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2 人癌細(xì)胞,MCF-7細(xì)胞 SPC-A-1()地美司鈉質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Dimesna
人卵巢;PA-1甲磺酸多拉司瓊質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRDolasetron mesylate
ICAM2 Others Human 人 CD102 / ICAM2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 地拉羅司,去鐵斯若質(zhì)量規(guī)格:>99.0%Deferasirox
CM-H069人膀胱平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL地拉羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Deferasirox
CPLX3 Others Human 人 CPLX3 / Complexin 3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 利培酮質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Risperidone
成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-sfTIBA2,3,5-三代本酸5克CP,99%
IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2-(4-叔丁基苯)-5-(... 2-(4-tert-Butylphenyl)-5-(4-biphenylyl... 15082-28-7 5G 通用試劑
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN務(wù)二晴punum>98% Glutcronitnilq 244-13-8
F2-2細(xì)胞,5-8轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系 小鼠色素瘤細(xì)胞,B16BL6細(xì)胞 CM-H047人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLTOTALPROTEINCELLLYSISBUFFER總蛋白細(xì)胞裂解緩沖液蛋白組學(xué)級(jí)透明無色液體COLDsigma
NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21343-88-0硅酸載體 silicate
RT-豬病毒型探針法熒光定量PCR試劑盒幼蚊細(xì)胞;C6/36 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤,PC-12細(xì)胞 HeLa 229(細(xì)胞)L-異亮氨酸叔丁酯鹽酸鹽L-Isoleucine t-butyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人上皮細(xì)胞;Hep-2L-谷氨酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
PRMT6 Others Human 人 PRMT6 / HRMT1L6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 谷胱甘肽(還原型)Glutathione (Reduced);GSH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)L-谷胱甘肽(標(biāo)準(zhǔn)品)Glutathione (Reduced)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品,還原型
F3 Others Human 人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 谷胱甘肽(氧化型)Glutathione(Oxidized)質(zhì)量規(guī)格:度大于98%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。