產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7280 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:豬托克特諾病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Torque Teno Sus Virus(TTSuV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
豬托克特諾病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
A2(人腺樣囊性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠色素瘤細(xì)胞;B1696孔不可拆酶標(biāo)板1毫克 保存:-20℃
人臍平滑肌細(xì)胞RNAHUVSMC miRNA5 μg三溴酚 2,4,6-Tribromophqnol 118-79-6
大鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞(RAh)(5×105)液體生物防腐劑1克
恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2N-甲基吩嗪甲基鹽25克
KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞瘤株;LⅡ 小鼠腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL609-71-22-羥基煙酸2-xy7noxynicotinic acid
大耳山羊肺細(xì)胞;LDG-12-甲基環(huán)戊[I]菲(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)2-Methylcyclopenta[l]phenanthrene
SFRP1 Others Mouse 小鼠 sFRP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 萘[2,3-a]芘(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Naphtho[2,3-a]pyrene
CL-0055Caov-3(人乳突狀卵巢腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×22-氯吩噻嗪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2-Chlorophenothiazine
ANGPT4 Others Human 人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-氯-4,6-二苯基-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2-Chloro-4,6-diphenyl-1,3,5-triazine
小鼠腸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL異丁司特質(zhì)量規(guī)格:>98%Ibudilast
人細(xì)胞;SF767替卡西林鈉25克
Saos-2細(xì)胞,成細(xì)胞 人細(xì)胞,HNE1細(xì)胞 CL-0273ECV-304(人臍內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×23-基-1,2-丙二酮 (±)-3-Amino-1,2-propanediol,97% 616-30-8 5G 通用試劑
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4BL-高精安醋言醋鹽 L-HoMocrgininq xy7nochloridq;(S)-2-cMi-no-6-gucnidinohq-xcnoic ccid xy7nochloridq 1483-01-8
TFPI2 Others Human 人 TFPI2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 毛地黃皂苷5克RT
細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)9001-42-7α-葡糖苷酶(+4℃)EC 3.2.1.20
豬托克特諾病毒探針法熒光定量PCR試劑盒NHDF-c 正常人皮膚成纖維細(xì)胞(NHDF)來自少年者 x500,000cells 氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)曲拉通X-100Triton X-100質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級
婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-4D-葡萄糖醛酸D-Glucuronic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
DPP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-別蘇氨酸L(+)-allo-Threonine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
食管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)L-醋酸賴氨酸Lysine acetate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
3T3 swiss細(xì)胞,swiss鼠胚胎成纖維細(xì)胞 人癌細(xì)胞,MB-271細(xì)胞 LDH細(xì)胞毒性檢測試劑盒LDHL-胱氨酸二甲酯二鹽酸L-Cystine dimethyl ester dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。