產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7422 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
大鼠細胞;Y3-Ag 1.2.32,7-二溴芴(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Dibromofluorene
QG-56細胞,肺扁平上皮癌細胞 人口腔上皮癌長春新堿耐藥株,KB/V細胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-C22,7-二溴-9-芴酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Dibromo-9-fluorenone
小鼠腹水瘤細胞;S-1802,7-二溴萘(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Dibromonaphthalene
IFNGR1 Others Human 人 IFN-gamma R1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,7-二溴-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)2,7-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]
人小腦顆粒細胞裂解物HCGCL2,6-二甲基-3,5-庚二酮(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione
PDGFRB Others Human 人 PDGFRB / PDGFR-1 / CD140b 人細胞裂解液 (陽性對照) L-半胱氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品L-Cysteine
人肺微內(nèi)皮細胞總RNAHPMEC NAL-半胱氨酸鹽酸鹽,一水質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRL-Cysteine hydrochloride monohydrate
HCC1937細胞,人癌細胞 鼠胸腺激酶缺陷細胞株,L-MTK細胞 原代細胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100mlDL-半胱氨酸質(zhì)量規(guī)格:>97%,易氧化DL-Cysteine
M-NFS-60 (小鼠細胞G-CSF依賴性) 5×106cells/瓶×2L-谷氨酰胺叔丁酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:0.98L-Glutamine t-butyl ester hydrochloride
HDBEC adult Pellet 人皮膚內(nèi)皮細胞團塊(成年捐獻者) > 1 mio.cells 間充質(zhì)干細胞軟骨細胞分化培養(yǎng)基MCDM-prfL-谷氨酸-5-叔丁酯-1-甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRL-Glutamic acid 5-tert-butyl 1-methyl ester hydrochloride
EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標(biāo)簽)L(+)-2-基-5-脲戊酸,英文名或英文縮寫:L-Citrulline,級別:BR,99%,規(guī)格:25克
HCC94(人子宮鱗癌細胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2 肝動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1,2-二基本;鄰二基本 1,2-Diqthylbqnzqnq 132-01-3
HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞桑色速;摩林;皇;2′,3,4′,5,7-五羌基皇同 Morin;Tqtrcxy7noxyflcvcnol;2′-xy7noxypqlcrgidqnolon;Ncturcl yqllow 8;Ncturcl yqllow 11;C.I. 75660 624022-01-3
SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) 媒染藍B,英文名或英文縮寫:Acid alizarin blue B,級別:ACS級,規(guī)格:1克
人正常肺上皮細胞;BEAS-2B1114-34-7D-來蘇糖D-LYXOSE
芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 5,5-二甲基-1,3-環(huán)己二酮5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedione質(zhì)量規(guī)格:BR
JeKo-1 人套細胞瘤細胞5-氟胞苷(>98%,BR)5-Fluorocytidine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
22RV1人細胞 Human prostate cancer 22RV1 cells 人4-甲基傘形酮-β-D-木糖苷4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews質(zhì)量規(guī)格:0.99
其他細胞因子2-脫氧-D-核糖2-Deoxy-D-Ribose質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠海馬趾神經(jīng)細胞(MH-h)(1×106) HCT116, 人結(jié)細胞 HumanD-半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品)D-Galactose質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品