產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7422 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產品參數:
產品僅供科研使用產品名稱:芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
產品規(guī)格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
大鼠細胞;Y3-Ag 1.2.32,7-二溴芴(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Dibromofluorene
QG-56細胞,肺扁平上皮癌細胞 人口腔上皮癌長春新堿耐藥株,KB/V細胞 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C22,7-二溴-9-芴酮(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Dibromo-9-fluorenone
小鼠腹水瘤細胞;S-1802,7-二溴萘(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Dibromonaphthalene
IFNGR1 Others Human 人 IFN-gamma R1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,7-二溴-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(HPLC)(T))質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)2,7-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]
人小腦顆粒細胞裂解物HCGCL2,6-二甲基-3,5-庚二酮(>97.0%(GC))質量規(guī)格:>97.0%(GC)2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione
PDGFRB Others Human 人 PDGFRB / PDGFR-1 / CD140b 人細胞裂解液 (陽性對照) L-半胱氨酸(標準品)質量規(guī)格:>98%,標準品L-Cysteine
人肺微內皮細胞總RNAHPMEC NAL-半胱氨酸鹽酸鹽,一水質量規(guī)格:>99%,BRL-Cysteine hydrochloride monohydrate
HCC1937細胞,人癌細胞 鼠胸腺激酶缺陷細胞株,L-MTK細胞 原代細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100mlDL-半胱氨酸質量規(guī)格:>97%,易氧化DL-Cysteine
M-NFS-60 (小鼠細胞G-CSF依賴性) 5×106cells/瓶×2L-谷氨酰胺叔丁酯鹽酸鹽質量規(guī)格:0.98L-Glutamine t-butyl ester hydrochloride
HDBEC adult Pellet 人皮膚內皮細胞團塊(成年捐獻者) > 1 mio.cells 間充質干細胞軟骨細胞分化培養(yǎng)基MCDM-prfL-谷氨酸-5-叔丁酯-1-甲酯鹽酸鹽質量規(guī)格:>95%,BRL-Glutamic acid 5-tert-butyl 1-methyl ester hydrochloride
EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽)L(+)-2-基-5-脲戊酸,英文名或英文縮寫:L-Citrulline,級別:BR,99%,規(guī)格:25克
HCC94(人子宮鱗癌細胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2 肝動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1,2-二基本;鄰二基本 1,2-Diqthylbqnzqnq 132-01-3
HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞桑色速;摩林;皇;2′,3,4′,5,7-五羌基皇同 Morin;Tqtrcxy7noxyflcvcnol;2′-xy7noxypqlcrgidqnolon;Ncturcl yqllow 8;Ncturcl yqllow 11;C.I. 75660 624022-01-3
SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) 媒染藍B,英文名或英文縮寫:Acid alizarin blue B,級別:ACS級,規(guī)格:1克
人正常肺上皮細胞;BEAS-2B1114-34-7D-來蘇糖D-LYXOSE
芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 5,5-二甲基-1,3-環(huán)己二酮5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedione質量規(guī)格:BR
JeKo-1 人套細胞瘤細胞5-氟胞苷(>98%,BR)5-Fluorocytidine質量規(guī)格:>98%,BR
22RV1人細胞 Human prostate cancer 22RV1 cells 人4-甲基傘形酮-β-D-木糖苷4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews質量規(guī)格:0.99
其他細胞因子2-脫氧-D-核糖2-Deoxy-D-Ribose質量規(guī)格:>98%,BR
小鼠海馬趾神經細胞(MH-h)(1×106) HCT116, 人結細胞 HumanD-半乳糖(標準品)D-Galactose質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品