產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7438 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:蟹源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
蟹源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
F9 小鼠γ-球蛋白(牛)shēng huà shì jì容量:100克
SIGIRR Others Human 人 SIGIRR / TIR8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-(二環(huán)己基膦基)-1-本基吲哚 95% (NMR) 2-(Dicyclohqxylphosphino)-1-phqnylindolq 740812-36-2
人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC鋁片shēng huà shì jì容量:RT500克
PSG6 Others Human 人 PSG6 / PSG10 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Na-本甲酰-L-精酰胺鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:25毫克
CL-0302PA319(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×27579-20-63-基-4-羧酸3-Aminoisonicotinic acid
OVAC細(xì)胞,人細(xì)胞 猴腎C細(xì)胞,M145細(xì)胞 視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)乙二醇雙(4-羧苯基)(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)Ethylene Glycol Bis(4-carboxyphenyl) Ether
EB (NBL-4) (牛胚氣管細(xì)胞) 5×106cells/瓶×29,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene
HREpC Pellet 人類腎小管上皮細(xì)胞團塊 > 1 mio.cells 人心肌細(xì)胞cDNAHCM cDNApre-ELM-11(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)pre-ELM-11
CL-0042BxPC-3(人原位胰腺腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2苯均四酸(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)Pyromellitic Acid
IgG Others Human 人 IgG1 Fc CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙丙昔羅鈉質(zhì)量規(guī)格:>99%,BREfaproxiral
FibroFectagen? 成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒,CRYSTALLINE(環(huán)已亞胺)超級100MGCOLD
CD52 Others Rat 大鼠 CD52 / CDW52 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鄰安基本加醋(易制讀-1) cnthrcnilic ccid 118-9-3
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLNystatin制真菌素250毫克BR,魚鱗提取
TMNE細(xì)胞,化學(xué)轉(zhuǎn)化小鼠鼻咽上皮細(xì)胞 C6(腦細(xì)胞) 牛腎細(xì)胞;MDBKL-焦谷酸25克
EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)(NAA)
蟹源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒THP1細(xì)胞,人單核細(xì)胞型瘤 人導(dǎo)管瘤細(xì)胞,BT-474細(xì)胞 非必需氨基酸 100XNEAA4-叔丁基二苯硫(>98.0%(GC))4-tert-Butyldiphenyl Sulfide質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO雙(4-羥苯基)硫(>98.0%(GC))Bis(4-hydroxyphenyl) Sulfide質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
IL18BP Others Human 人 IL18BPa 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-(二乙基氨基)苯二苯腙(>98.0%(HPLC)(N))4-(Diethylamino)benzaldehyde Diphenylhydrazone質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)
猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-1,1'-二萘胺(>98.0%(HPLC)(N))1,1'-Dinaphthylamine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)
IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,2'-二萘胺(>98.0%(GC))2,2'-Dinaphthylamine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)