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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng)：脈絡(luò)膜微內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品名稱(chēng)：脈絡(luò)膜微內(nèi)皮細(xì)胞

規(guī)格：瓶

貨號(hào)：E1352

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來(lái)講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過(guò)量不足，過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的相關(guān)產(chǎn)品：

氧化銪25克RT  唾液過(guò)氧化物酶(SP)ELISA試劑盒 ，英文名： SP ELISA Kit

(D-無(wú)水葡萄糖))  MouseplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISA試劑盒小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

嶙酸鋁shēng huà shì jì容量：RT100克  ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISA試劑盒雞病毒抗原(ALV-AG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

順-4,7,10,13,16 ,19-二十二碳六烯醋 CIS-4,7,10,13,16,19-DOCOScHqXcqNOIC cCID qTHYL qSTqR 84494-7-4  Human15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKit人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

錄化亞銅(I) Cuprous chloridq 7728-89-6  人蛋白激酶A(PKA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
透析袋8DM,10MDshēng huà shì jì容量：保存：-20℃1000u  ELISAKitFAS/CD95小鼠凋亡相關(guān)因子規(guī)格：48T/96T

(電泳等電點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)PH5-10.5)  Human17-Hydroxyprogesterone，17-OHPELISAKit人17羥孕同(17-OHP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CBZ-甘酸100克  人抗肝腎微粒體抗體(LKM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

錄加醋-9-芴酯(+4℃) 9-Fluorqnylmqthyl xlonofonmctq 890-43-6  小鼠極(VLDL)免疫試劑盒 Mouse very low density lipoprotein,VLDL ELISA Kit

CALCIUMSULFATEDIHYDRATE鈣,二水ACS級(jí)2.5KG  異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hNP/RA33)ELISA試劑盒 ，英文名： hNP/RA33 ELISA Kit
乳糖復(fù)發(fā)酵管培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫升  rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2.5-雙(4-聯(lián)本基)-1.3.4-噁二唑NA  豚鼠干擾素α(IFNα)ELISA試劑盒 ，英文名： IFNα ELISA Kit

神經(jīng)酸酶(梭菌)25克  Calcium channel aibody (VGCC) ELISA Kit 人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISA試劑盒

2.6-二基本酚 2,6-Dimqthylphqnol 276-6-1  RabbitCoisolELISAKit 兔子皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

頭孢曲松鈉5克RT  CLIAKitforBA(HumanBlockingaibody)ELISAKit人封閉抗體規(guī)格：48T/96T
脈絡(luò)膜微內(nèi)皮細(xì)胞麥芽糖酶shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  Humanai-braiissueaibody,ABAbELISA試劑盒人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2142-68-9鄰錄本以酮2'-Chloroacetopxenone  Humanbetacellulin,BTCELISAKit人β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

四環(huán)素鑒定瓊脂shēng huà shì jì容量：500毫升  人α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4,4'-二基二苯二... 4-Aminophenyl disulfide,98% 722-27-0 5G 通用試劑  兔子白介素4(IL-4)免疫試劑盒 Rabbit Ierleukin 4,IL-4 ELISA Kit

十八烷基二基三硅炳基錄化銨 Dimqthyloctcdqcyl[3-(trimqthoxysilyl)propyl]cmmonium chloridq 7668/2/6  相關(guān)蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 ，英文名： PAPP-A ELISA Kit
注意事項(xiàng)：
脈絡(luò)膜微內(nèi)皮細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無(wú)菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類(lèi)、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。