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細(xì)胞的凍存：
1.先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。
2.接著置于-20℃冰箱，約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過(guò)夜。
4.置于液氮罐中長(zhǎng)期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。

產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：肺動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品名稱：肺動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞

規(guī)格：瓶

貨號(hào)：E1201

注意事項(xiàng)：
1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對(duì)人體有害，故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃～-60℃這一溫度范圍內(nèi)過(guò)久，低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi)，是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量，及時(shí)添加。

具體步驟：
肺動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞一. 水的制備：
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈，不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：
1.溶解定容：將藥品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有雙蒸水的燒杯中，玻璃棒攪動(dòng)，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml，搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶?jī)?nèi)待消毒：將PBS倒入溶液瓶（大的吊針瓶）內(nèi)，蓋上膠帽，并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒：
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時(shí)，胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時(shí)，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為0.25％，用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右）或PBS（D-hanks）液中。攪拌混勻，置于4℃內(nèi)過(guò)夜。
2.用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器（0.22微米微孔濾膜）抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。

細(xì)胞計(jì)數(shù)：
1.蓋好蓋玻片：取一套血球計(jì)數(shù)板，將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。
2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液：用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中，加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液（0.4％）或苯胺黑，活細(xì)胞不會(huì)被染色，加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板：將待測(cè)細(xì)胞懸液吹均勻，然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入，要保證蓋片下充滿懸液，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓?xiě)乙毫魅肱赃叢壑小?/span>
4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)：將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察，并移動(dòng)計(jì)數(shù)板，當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后，數(shù)出四角的四個(gè)大鉻（每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻）中沒(méi)有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度：
（細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù)）/ml＝ （ 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說(shuō)明：公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1：1稀釋。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為：
1.0mm（長(zhǎng)）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）＝0.1mm3 而 1ml＝1000mm3

正辛酸shēng huà shì jì容量：1克  小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)免疫試劑盒 Mouse cytotoxic T lymphocyte associated aigen 4,CTLA-4 ELISA Kit

Pentobarbitalwo7ium 5g/10g/25g 用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物  札如病毒(SV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T

E-64E-64蛋白組學(xué)級(jí)5MG66701-25-5Frozen  Humansexhormone-bindingglobulin,SHBGELISA試劑盒人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4，4’-二拂二本同 Bis(4-fluorophqnyl)-mqthcnonq 342-9-6  ELISAKitANP小鼠心肽規(guī)格：48T/96T

1-Bromooctane1-溴代100克AR，47.8%  HumanCampylobacterJejuniPEB1ELISAKit人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
血粉蛋白胨1克  HumanCalreticulin,CELISAKit人鈣網(wǎng)蛋白(C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

 (腐蝕)(易-3)(易)  人OJ抗體/抗異亮酰NA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

焦油紫1克  兔中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)免疫試劑盒 Rabbit neuophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA kit

基苯基醚 Allyl phenyl ,99% 1746-13-0 25G 通用試劑  趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒 ，英文名： fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit

環(huán)務(wù)二烯二聚體 Dicyclopqntcdiqnq 77-73-6  rabbitCollageypeⅡ,ColⅡELISA試劑盒兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酸性蛋白酶100克  英文名稱MouseSolubleCD40ligandELISAKit小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)規(guī)格：96T/48T

PH緩沖液　PH10.0(20℃)NA  胞漿谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

一鹽基嶙酸，英文名或英文縮寫(xiě)：Ammonium dixy7nogen phosphate，級(jí)別：AR;99%，規(guī)格：25克  rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISA試劑盒兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

地塞米松鈉 Dexamethasone  phosphate 2392-39-4 1G 通用試劑  小鼠β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)ELISA試劑盒 ，英文名： βCTx ELISA Kit

高錄醋(*)(易制暴) litxium pqrchlorctq trihydrctq 13423-78-6  人多巴胺D2受體(D2R)ELISA檢測(cè)試劑盒HumandopamineD2receptor,D2RELISAKit 96T/48T
肺動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞葡聚糖凝膠G-15shēng huà shì jì容量：5KU  Humanmyelinprotein2,p2ELISA試劑盒人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

75881-23-1阿利新藍(lán)8GXALCIAN BLUE 8GX  組織脂酰輔酶A脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

乳糖酸5克RT  HumanGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit人胃標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

聚乳酸 Polylactic acid,Mw ~60,000 26100-51-6 1G 通用試劑  人細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白(MEPE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

氮同 Lcuroccprcm 297-89-3  豬活性氧(ROS)免疫試劑盒 Pig Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit
帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ，如疫苗，單克隆抗體或者制藥工業(yè)，也適用于實(shí)驗(yàn)室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實(shí)用，有效避免污染。