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使用方法：
收到細(xì)胞主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞直銷后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞直銷
簡稱：主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1213

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基1公斤  MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISA試劑盒小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(Tris飽和酚)  ELISAKitIgA兔子免疫球蛋白A規(guī)格：48T/96T

聚乙二醇20000shēng huà shì jì容量：250毫克  ChickenIerferonγ,IFN-γELISAKit雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

隊(duì)典本晴 4-Iodobqnzonitnilq 3028-39-7  人庚肝抗體(HGVAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

甲殼胺shēng huà shì jì容量：500克  小鼠白介素1受體相關(guān)激酶1(IRAK1)免疫試劑盒 Mouse Ierleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1 ELISA kit
石墨粉shēng huà shì jì容量：250克  血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)ELISA試劑盒 ，英文名： SAA4 ELISA Kit

(幾丁質(zhì)(甲殼素))  MouseCoisolELISA試劑盒小鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脫氧核糖核酸酶Ⅱ(豬脾)25克  ELISAKitPAL小鼠L苯氨酸解氨酶規(guī)格：48T/96T

A1-抗胰蛋柏酶 cLPHc-1-cNTITRYPSIN 9041/9/3  ChickenPlateletFactor4,PF-4ELISAKit雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-啊拉伯糖 D(-)-crcbinosq 8697-23-  人激活素A(Activin A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
錄吡本脲shēng huà shì jì容量：100克  組織SRCN1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

碳加氫催化劑NA  HumanOrnithinedecarboxylase,ODCELISAKit人鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1-奈酚100毫克  兔子白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

沉香油醇 Linalool,97% 78-70-6 25ML 通用試劑  Human angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 人生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒

乳糖 Lcctosq stcndcrd 10039-6-6  Humanai-cellmembraneDNAaibody,cmDNAELISAKit 人抗細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞直銷肝素溶液支RT  人抵抗素(Resistin)ELISA檢測試劑盒humaesistinELISAKIT 96T/48T

126213-50-13,4-二氧1吩3,4-etxylenedioxythiopxene  大鼠抗IgE受體抗體免疫試劑盒 Rat ai-IgE receptor aibody ELISA Kit

淀粉酶測試盒shēng huà shì jì容量：1個(gè)  英文名稱RatPyriLinksELISAKit大鼠吩(PyriLinks)規(guī)格：96T/48T

2，2’-二-4，4’-二羧醋(+4℃) 2,2'-BICINCHONINIC cCID 142-13-  酒類尿素比色法定量檢測試劑盒20次

品紅亞鈉培養(yǎng)基(濾膜法用)shēng huà shì jì容量：1米  ELISAKitHLAMP-2人溶酶體相關(guān)膜蛋白2規(guī)格：48T/96T

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。