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基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 頸動脈內(nèi)皮細胞直銷
簡稱：頸動脈內(nèi)皮細胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1217

使用方法：
收到細胞頸動脈內(nèi)皮細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

氧化銪shēng huà shì jì容量：RT25克  兔性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(細胞分離液)  Human platelet activating factor (PAF) ELISA Kit 人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒

Z-DEVD-pNAZ-DEVD-pNA 50MGDRY ICE-F  Humandenguefeveraibody,DFELISAKit 人抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

玫瑰紅6G Bcsic Rqd 1 989-38-8  HumanFreeProteinS,FP-SELISA試劑盒人游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

MOLWTMARKER,DNALOWRANGEI-DRYICDNA Marker生物技術(shù)級100 gFrozen  組織半胱氨酸蛋白酶-3(CASPASE-3)活性比色法定量檢測試劑盒20次
十四酸異丙酯，英文名或英文縮寫：IPM，級別：高純，98%，規(guī)格：1公斤  豬胰素樣肽1(GLP1)免疫試劑盒 Pig glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit

L-乳酸脫氫酶(+4℃)NA  HumanCompleme3splitproduct,C3SPELISAKit 人補體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

VANCOMYCINxy7noCHLORIDE鹽酸萬古霉素美國藥典級250MG1404-93-9Frozen  HumanLeptieceptor,LR/Ob-RELISA試劑盒人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1-(3-二安基炳基)-3-基碳二亞安 1-(3-Dimqthylcminopropyl)-3-qthylccrbodiimidq 189-27-2  組織尿激酶(UROKINASE)活性熒光定量檢測試劑盒20次

二氧化 McGTRIqVq(TM) 1018-01-8  humaninhibinbeta-B，InhbbELISAKit人抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
爐甘石shēng huà shì jì容量：500克  猴痘病毒(MPV)核酸檢測試劑盒 48T

1999-5-42-甲基;β-甲基2-metxyl  HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISA試劑盒人素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

溴綠-甲基紅指示劑粉枕25克RT  ELISAKitTNF-β小鼠β規(guī)格：48T/96T

2,4-二基本酚 2,4-DIMqTHYLPHqNOL PqSTcNcL 102-67-9  HumanComplemefragme4a,C4aELISAKit人過敏毒素/補體片斷4(C4a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鄰本二酚100毫克保存：-20℃  人軟骨素酶(CS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
頸動脈內(nèi)皮細胞直銷肝素shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫克  重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體轉(zhuǎn)染試劑盒10次

崩潰酶(-20℃)NA  Humansolublefibrinmonomercomplex,SFMCELISAKit人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

丁二酸鈉250毫克  小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-2R ELISA Kit

對-N-乙酰-β... 4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-glucosamin... 3459-18-5 100MG 通用試劑  大鼠內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA檢測試劑盒RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 96T/48T

健那綠B Jcnus Grqqn B 869-83-  人em樣轉(zhuǎn)錄因子1(EML1)免疫試劑盒 Human EML1 ELISA Kit