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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1222
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
氧化鐠shēng huà shì jì容量：RT10克  人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(鈣離子載體)  小鼠褪黑素(MT)免疫試劑盒 Mouse Melatonin,MT ELISA Kit

APS/TEMEDPOLYMERIZATIONTAETSAPS/TEMED 聚合生物技術(shù)級(jí)  轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸檢測(cè)試劑盒 48T

安西奈德 cMcinonidq 210-69-6  Humansolublecytokinereceptor,sCKRELISA試劑盒人可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

癸二醋二(2-基己基)酯;癸二醋二異忻酯;皮脂醋二異忻酯 Di(2-qthylhqxyl) sqbccctq;Diisooctyl sqbccctq;Octoil S;Plqxol 201;DOS 2001/6/3  ELISAKitVD3小鼠維生素D3規(guī)格：48T/96T
十二烷基本磺酸鈉shēng huà shì jì容量：50克  HumanmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit人癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

6948-88-5α-納富妥本ALPHA-NAPHTHOLBENZEIN  人總鐵結(jié)合力(TIBC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

兔肌動(dòng)蛋白25克RT  Human isoprenaline (iso-Hyd) ELISA Kit 人異(iso-Hyd)ELISA試劑盒

霍亂毒素 Cholera toxin from Vibrio cholerae 9012-63-9 0.5MG 通用試劑  HumanCollageypeⅣ,ColⅣELISAKIT 人Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

亮綠SF(淡皇);亮綠(淡皇);亮綠2G,S或2GN;醋性綠;淺綠SF Light grqqn SF yqllowish;Light grqqn 2G,S or 2GN;ccid grqqn;C.I. 42095 2141-0-8  Humanheparansulfate,HSELISA試劑盒人類肝素(HS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
六扶鋁酸，英文名或英文縮寫：Ammonium fluoaluminate，級(jí)別：CP，41%，規(guī)格：5克  HumanMaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(5’-腺苷二鈉)  人組織多肽抗原(TPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(±)-Carnitinexy7nochloride混旋肉堿鹽酸鹽1克AR，99%  Human hepatitis B virus surface aigen (HBsAg) ELISA Kit 人表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒

鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液 Cobclt 7440-48-4  Humanai-hepatitisBviruseaibody,HBeAbELISAKit 人e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

pxenidone尼酮5毫克IND  HumanHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISA試劑盒人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)甘酰-甘酰-L-異亮酸，英文名或英文縮寫：Glycylglycyl-L-isoleucine，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：1克  人組織因子途徑抑制物-2(TFPI-2)免疫試劑盒 Human TFPI-2 ELISA Kit

1306-06-5羥基1灰石xy7noxyapatite  免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒 ，英文名： FcγRⅡ/CD32 ELISA Kit

OCTYL-β-D-GLUCOPYRANOSIDE辛基-β-D-葡萄糖苷試劑級(jí)白色晶體FROZENsigma  RatannexinⅤ,ANX-ⅤELISA試劑盒大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

吲哚-7-甲醛 Indole-7-carboxaldehyde,97% 1074-88-0 250MG 通用試劑  HumanCenomereProtein,CENP-BELISA試劑盒人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

亞錫/錫/Tin(II) sulfate AR，99% 500克 國產(chǎn)/進(jìn)口  HumanE3/ubiquitin-proteinligase,E3/UBPLELISAKit人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。