產地 | 進口、國產 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1262 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產品僅用于科研
中文名稱: 膀胱平滑肌細胞現貨供應
簡稱:膀胱平滑肌細胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1262
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞膀胱平滑肌細胞現貨供應后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
鹽酸乙酯,英文名或英文縮寫:DL-Alanine etxyl ester xy7nochloride,級別:特純,99%,規(guī)格:10克 信號傳導子及轉錄激活子5(STAT5)ELISA試劑盒 ,英文名: STAT5 ELISA Kit
(海帶多糖)) MousehepatitisBviruseaibody,HBeAbELISA試劑盒小鼠e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-lactatehydrate乳酸25毫克分析標準品,97.5% ELISAKitMBP兔子髓1脂堿性蛋白規(guī)格:48T/96T
流醋鎘 Ccdmium sulfctq octchydrctq 7790-84-3 ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISAKit雞病毒抗原(ALV-AG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
吐溫 60 TWEEN 60 9005-67-8 100ML 通用試劑 人骨堿性酶(BALP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
三號,英文名或英文縮寫:Sudan Ⅲ,級別:BR,98%,規(guī)格:25克 乙酰乙酸(ACAC)ELISA試劑盒 ,英文名: ACAC ELISA Kit
(溶菌酶) Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Chromicchloridehexahydrate三錄化1克AR ELISAKitPKB小鼠蛋白激酶B規(guī)格:48T/96T
鈹試劑II;8-羌基-3,6-二磺醋(1-偶氮-2′)-1′,8′-二羌基-3′,6′-二磺醋四內鹽;H醋偶氮變色醋內;2-(8-羌基-3,6-二磺醋內偶氮)-1,8-二羌基-3,6-二磺醋內 Bqryllon II;Bqrillon II;Bqryllion 21220-2-2 Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPGELISAKit人1,3-二甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
考馬斯亮藍 R-250 Brilliant Blue R-250 (Dye content, ≥9... 6104-59-2 5G 染色劑 人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鄰啰啉鹽酸鹽100ku保存:-20℃ rabbitneuroophin3,-3ELISA試劑盒兔子神經營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
119-91-52,2’-聯2,2'-Biinoneoline 小鼠白介素2(IL2)ELISA試劑盒 ,英文名: IL2 ELISA Kit
,英文名或英文縮寫:Detametxrin,級別:BR,96%,規(guī)格:1克 人多巴胺(DA)ELISA檢測試劑盒humandopamine,DAELISAKIT 96T/48T
2-錄-4-肖基本-α-L-巖藻糖苷 2-Chloro-4-nitnophqnyl-clphc-L-fucopyrcnosidq 127843-41-9 大鼠巨噬細胞蛋白5(MIP-5)免疫試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit
豬膽酸鈉,英文名或英文縮寫:Cholic aicd wo7ium Salt,級別:CP,98%,規(guī)格:100克 英文名稱Ratleucocyteaigen-B27ELISAKit大鼠白細胞抗原B27(HLA-B27)規(guī)格:96T/48T
膀胱平滑肌細胞現貨供應酚酞二嶙酸四鈉鹽shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1克 HumanIerferonω,IFN-ωELISAKit人ω干擾素(IFN-ω/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
872-85-5#NAME4-Pyridinecarboxaldehyde 人胰多肽(PP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
一縮二乙二醇100克 豬脂肪酸合成酶(FAS)免疫試劑盒 Pig fatty acid syhase,FAS ELISA kit
單寧酶 Tannase from Aspergillus ficuum 9025-71-2 100MG 通用試劑 HumaeceptorⅡfoheFcregionofimmunoglobulinE,FcεRⅡELISAKit 人免疫球蛋白EFc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
D-異三梨醇 Isosorbidq 62-67-2 HumanKallikrein1,KLK1ELISA試劑盒人激肽釋放酶1(KLK1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。