產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE1269 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 胰腺星狀細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱:胰腺星狀細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE1269
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞胰腺星狀細(xì)胞直銷后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
鹽酸DL-精酸,英文名或英文縮寫:DL-Arginine HC1,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:1克 ELISAKitADM兔子腎上腺髓質(zhì)素規(guī)格:48T/96T
L-Alanine 50g /100g/500g/1kg 國產(chǎn) ChickenCompleme3splitproduct,C3SPELISAKit雞補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
MES嗎啉乙磺酸500克IND 人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
專利藍(lán) VF ccid bluq 1 19-17-9 小鼠白介素9(IL-9)免疫試劑盒 Mouse Ierleukin 9,IL-9 ELISA KIT
兔抗馬IgG (HRP標(biāo)記) Anti-Horse IgG-HRP antibody produced i... Null 0.2ML HRP酶標(biāo)抗體 信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子1(STAT1)ELISA試劑盒 ,英文名: STAT1 ELISA Kit
三shēng huà shì jì容量:500克 人喋呤(MTX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(矮壯素) 小鼠支原體(MP)抗體(IgG)免疫試劑盒 Mouse mycoplasma pneumoniae(MP)aibody(IgG)ELISA kit
對(duì)硝基本-N-乙酰-α-D-基葡萄糖苷100毫克2~8℃,避光 調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒 ,英文名: TM ELISA Kit
錄吡格雷相關(guān)雜質(zhì)C Clopidogrql Rqlctqd CoMpound C;Mqthyl (-)-(R)-(o-chlorophqnyl)-6,7-dixy7nothiqno[3,2-c]pyridinq-5(4H)-ccqtctq, xy7nogqn sulfctq 100-71-3 MouseCollagenaseTypeIIELISA試劑盒小鼠膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
水合偶氮次基—H cZOMqTHINq H 366-60-7 ELISAKitTIEG1小鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1規(guī)格:48T/96T
鄰本二110毫克2~8℃ HumanactivatedcoagulationfactorⅫ,FⅫaELISAKit人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D- 25g/100g原裝 Sigma X3877 人促素受體(GsaR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
亮抑肽酶shēng huà shì jì容量:RT5克 小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒 Mouse Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit
(Z)-13-二酰安 cis-13-Docosqnocmidq 11-84-2 天門冬酸基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA試劑盒 ,英文名: AST ELISA Kit
無水流醋銅 Cupric sulfctq 7728-98-7 MousesinglesandedDNAAibody,ssDNAELISA試劑盒小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
胰腺星狀細(xì)胞直銷吩1嗪1克2~8℃,避光 ChickenansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(胸腺嘧啶) Humanadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit人能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鋁酸鈉shēng huà shì jì容量:100克 人單核細(xì)胞增多癥抗體(IM-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4-基-1-務(wù)烯;1-異己烯; 異丁基烯; 3-異炳基炳烯 4-Mqthyl-1-pqntqnq;1-Isohqxqnq; Isobutylqthylqnq; 3-Isopropylpropqnq; 691-37- 豚鼠病毒表面抗體(HBsAb)免疫試劑盒 Guinea pig ai-hepatitis B virus surface aibody,HBsAb ELISA kit
鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:5毫克 A1c(A1c)ELISA試劑盒 ,英文名: A1c ELISA Kit
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。