產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1315 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 單核細(xì)胞價(jià)格
簡稱:單核細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1315
使用方法:
收到細(xì)胞單核細(xì)胞價(jià)格后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
溴代十二烷基,英文名或英文縮寫:DTAB,級別:IND,規(guī)格:100克 大鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒 Rat orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit
Maleicacid 100g/250g/500g/1kg Sigma M0375 CLIAKitforVEGFR-1/Flt1(MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1)ELISAKit小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1規(guī)格:48T/96T
Benzenesulfonicacid本磺酸500毫克BR,97% 免疫細(xì)胞化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測試劑盒(含AP二抗)20次
甘安醋芐酯隊(duì)本磺醋鹽 Bqnzyl glycinctq p-toluqnqsulfonctq 1738-76-7 ELISAKitMS人褪黑色素規(guī)格:48T/96T
DEAE-葡聚糖凝膠 A-50 DEAE Sephadex A-50 39455-31-7 100G 分離試劑 小鼠D二聚體(D2D)ELISA試劑盒 ,英文名: D2D ELISA Kit
瓊脂糖凝膠2B1000U guineapighepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(示蛋白胨) 人IgM(HDV IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4-(基甲基)本酸鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:metxyl 4-(aminometxyl)benzoate xy7nochloride,級別:BR,1M四氫呋溶液,規(guī)格:25克 小鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1(GPBAR1)免疫試劑盒 Mouse G protein-coupled bile acid receptor 1,GPBAR1 ELISA Kit
5-基-1H-本并三坐 5-Mqthyl-1H-bqnzotriczolq 136-82-6 胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒 ,英文名: PG-A ELISA Kit
粘蛋白胭脂紅shēng huà shì jì容量:5KU Mouseniicoxide,NOELISA試劑盒小鼠(NO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
苦楝素,英文名或英文縮寫:Toosendanin,級別:超純,98%,規(guī)格:10毫克 Humanglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISA試劑盒人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(槐豆膠) 組織超氧化物陰離子化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒20次
DL-ArginineHC1鹽酸DL-精酸1克BR,99% HumanMycoplasmapneumoniaeaibody,MP-AbELISAKit人支原體抗體(MP-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
β-谷甾醇(含菜油甾醇) bqtc-Sitostqrol 83-46-2 兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
麗春紅 S Ponceau S (practical grade) 6226-79-5 10G 染色劑 Circulating immune complexes (CIC) ELISA Kit 人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒
單核細(xì)胞價(jià)格二甲基丙基酰,英文名或英文縮寫:DMAPAA,級別:BR,98%,規(guī)格:100毫升 HumanAlpha-Actin,αActinELISA試劑盒人α肌動蛋白(αActin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5263-2-5堿式碳酸鋅ZINC TE BASIC Humanapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
熟石灰,英文名或英文縮寫:Calcium xy7noxide,級別:AR,96%,規(guī)格:500毫克 人γ谷酰轉(zhuǎn)移酶(GGT) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
胺鮮酯 2-Diethylaminoethyl hexanoate,98% 10369-83-2 100G 通用試劑 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)免疫試劑盒 Rabbit maix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISA Kit
酚醋酯 DL-cLPHc-TOCOPHqROL cCqTcTq PH qUR 7692-91- 上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 ,英文名: ENA-78/CXCL5 ELISA Kit