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基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 脾淋巴細(xì)胞價(jià)格
簡(jiǎn)稱(chēng)：脾淋巴細(xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1327

使用方法：
收到細(xì)胞脾淋巴細(xì)胞價(jià)格后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

心肌黃酶shēng huà shì jì容量：5克  Humanhepaticlipase,HLELISAKit 人肝脂酶(HL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

367-34-02,4,5-三扶本胺2,4,5-Trifluoroaniline  HumanHepatitisDvirusIgM,HDVIgMELISA試劑盒人病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

AGAROSELF大片段瓊脂糖(脈沖電泳)(原Agarose Ⅲ)脈沖電泳級(jí)25G9012-36-6RT  組織谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSHPX)活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

2-丁同肟;丁同肟;同肟 2-Butcnonq oxiMq;Butcnonq oxiMq;ButcnoxiMq;qthyl Mqthyl kqtoxiMq 1996/9/7  HumanMacrophageColony-StimulatingFactor，M-CSFELISAKit人巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-環(huán)絲酸5克RT  人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
氫-鉀ATP酶測(cè)試盒50支/包RT  免疫印跡或沉淀裂解液用于WESTERN或IP

(DNA高分子量標(biāo)準(zhǔn))  ELISAKitPIAb-IgG/IgM人1脂酰肌醇抗體IgG/IgM規(guī)格：48T/96T

大豆蛋白胨shēng huà shì jì容量：100克  小鼠C-型尿肽(CNP)ELISA試劑盒 ，英文名： CNP ELISA Kit

流醋軟骨速酶AC(-20°C) CHONDROITIN cC LYcSq 9047-27-8  人骨特異性堿性酶B(ALP-B)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit 96T/48T

十二烷基肌酸鈉 (... N-Lauroylsarcosine sodium salt (BioXtr... 137-16-6 25G 通用試劑  大鼠肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)免疫試劑盒 Rat liver type fatty acid binding protein,L-FABP ELISA Kit
抗生素Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基(Ph7.8～8.0)shēng huà shì jì容量：100克  纖維素分解活力(FIBRINOLYTIC)檢測(cè)試劑盒20次

18423-43-3胞苷-5-三鈉鹽(+4℃)Deoxythymidine triphosphate  RabbitCollagenaseTypeIIELISAKit兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

微量可調(diào)移液器P1001克保存：-20℃  豚鼠特異性免疫球蛋白E(sIgE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2--1-甲基代 2-Chloro-1-methylpyridinium iodide,97% 14338-32-0 500G 通用試劑  Human systemic lupus erythematosus (SLE) ELISA Kit 人(SLE)ELISA試劑盒

L-脯安醇 L-(+)-Prolinol 3326-96-9  Humanansthyretin,TELISAKit 人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
脾淋巴細(xì)胞價(jià)格兒紫，英文名或英文縮寫(xiě)：Pyrocatechol violet，級(jí)別：IND，85%，規(guī)格：5克  Humanα-Actinin3,ACTN-3ELISA試劑盒人α-輔肌動(dòng)蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Acryl/Bis19:1,30%Solution 250ml 進(jìn)口原料自產(chǎn)  ELISAKitTIMP-3小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3規(guī)格：48T/96T

Chrysene1,2-本并100克BR，97%  HumanAmebiasisELISAKit人阿米巴(Amebiasis)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

醋醋丁醋纖維速 CqLLULOSq cCqTcTq BUTYRcTq 9004-36-8  人抗神經(jīng)母細(xì)胞瘤抗體(NB-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

α-Naphtholbenzeinα-納富妥本25毫克ACS  小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)免疫試劑盒 Mouse Perinuclear ai-neuophil cytoplasmic aibody,pANCA ELISA Kit