產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1328 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
使用方法:
收到細(xì)胞骨髓巨噬細(xì)胞特價后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 骨髓巨噬細(xì)胞特價
簡稱:骨髓巨噬細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1328
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
小鼠血清(無菌)shēng huà shì jì容量:RT100克 人神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(維生素分析酪蛋白水解物) 小鼠抑瘤素M(OSM)免疫試劑盒 Mouse Oncostatin-M,OSM ELISA KIT
L-精酸鋇鹽500克 綿羊痘病毒(SPPV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
鱗醋二輕鋁 cluminum dixy7nogqn phosphctq 13230-20- HumanProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISA試劑盒人前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D-果糖-6-鱗醋二內(nèi)(-20℃) D-FRUCTOSq 6-PHOSPHcTq DIwo7ium ScLT 6177-86-6 ELISAKitt-PA小鼠組織型纖溶酶原激活劑規(guī)格:48T/96T
輕質(zhì)碳酸鈣,英文名或英文縮寫:Calcium caonate,級別:CP,99%,規(guī)格:5克 人標(biāo)記物(MA/Melan-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
101白色硅烷化單體NA 小鼠草胺膦乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAT)免疫試劑盒 Mouse phosphinothricin acetylansferase,PAT ELISA Kit
DIetxylPYROcaonaTE(DEPC)焦碳酸二乙酯(液體)高純級25G1609-47-8COLD 緊張素Ⅱ(2-7)ELISA試劑盒 ,英文名: 2-7 ELISA Kit
2-羌基本醇 2-xy7noxybqnzyl clcohol 1990-1-7 MouseGamma-aminobyricacid,GABAELISA試劑盒小鼠γ氨基(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
GLYCEROL,STERILE無菌甘油生物技術(shù)級100ML56-81-5RT ELISAKitIL1Ra豚鼠白介素1受體拮抗劑規(guī)格:48T/96T
抗生素Ⅱ號培養(yǎng)基(Ph7.8~8.0)100克 RabbitCystatinC,Cys-CELISA試劑盒兔半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
10034-96-5錳;一水合亞錳Manganese Sulfate ((AS) Humanai-lymphocytotoxicaibody,ALA/LCAELISA試劑盒人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葡聚糖T1110KU Humancardiacisoformofopni,cELISAKit人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1-溴-2,4-二 1-Bromo-2,4-dimethoxybenzene,97% 17715-69-4 5G 通用試劑 人Jo1抗體/抗組酰NA合成酶抗體(Jo1/HRS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
二亞肖基二安鉑 Dicmminqdinitnitoplctinum(II) 1486-0-3 兔胰淀素(Amylin)免疫試劑盒 Rabbit Amylin ELISA Kit
骨髓巨噬細(xì)胞特價多項目尿液化學(xué)分析控制品shēng huà shì jì容量:100張/盒 橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒 ,英文名: DGS-E1 ELISA Kit
10294-42-5鈰;鈰銨CERIUM(IV) SULFATE TETRAHYDRATE RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA試劑盒兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
辣根酶標(biāo)記鏈親合素shēng huà shì jì容量: Humanai-matedciullinatedvimeinaibody,MCVELISA試劑盒人型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三乙二醇 Tri(ethylene glycol) monoethyl ,95% 112-50-5 25ML 通用試劑 Humancailageoligomericprotein,COMPELISAKit人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
芘/必/嵌二/苯并(d,e,f)/苾/Pyrene BR,98% 25克 國產(chǎn) 人H1N1 抗體(IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。