產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1350 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 結(jié)膜成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:結(jié)膜成纖維細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1350
使用方法:
收到細(xì)胞結(jié)膜成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞分裂素,英文名或英文縮寫:6-BA,級別:BR,90-95%,規(guī)格:5KU 人不對稱二甲基精酸(ADMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
14263-94-6固藍(lán)B鹽;重氮藍(lán)B鹽;藍(lán)光重氮色鹽藍(lán);堅牢藍(lán)B鹽;錄化四氮鄰二甲氧基本胺Fast blue B salt;Fast blue salt BN;o-Dianisidine tetrazotized;Dianisidine blue;Azoic diazo coMponent 48;Di-o-anisidine diazotatezinc double salt;Tetrazotized di-2-anisidine,ZnCl2;Echtblausalz B;Naphthanil diazo blue B salt 豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)免疫試劑盒 guinea pig hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit
3-基鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:β-Alanine metxyl ester xy7nochloride,級別:BR,98%,規(guī)格:10克 胎盤蛋白13(PP13)ELISA試劑盒 ,英文名: PP13 ELISA Kit
脂蛋白脂酶 Clearing factor lipase (10u/mg) 9004-2-8 1KU 通用試劑 Mouseoponi,Tn-TELISA試劑盒小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
錄仿(易制讀-2);;錄仿 ForMyl trichloridq;Mqthqnyl trichoridq;TrichloroMqthcrq Duckmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISA試劑盒鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氣單胞菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)50張/盒 rabbittissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Urea 250g/500g/1kg/5kg 原裝 Sigma U0631 CLIAKitforBcl-2(HumanB-cellleukemia/lymphoma2)ELISAKit人B細(xì)胞因子2規(guī)格:48T/96T
酚番紅花紅shēng huà shì jì容量:500u 纖維蛋白溶酶原激活劑抑制物(PAI)活性比色法定量檢測試劑盒20次
4-安基派啶 4-cminopipqridinq 13032-19-3 RabbitComplemefragme3a,C3aELISAKit兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
對胺shēng huà shì jì容量:100克 豚鼠生成素2(ANGPT2)ELISA試劑盒 ,英文名: ANGPT2 ELISA Kit
聚硅氧烷,英文名或英文縮寫:Silicone,級別:基準(zhǔn)試劑,99%,規(guī)格:250毫升 豚鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒 ,英文名: αHSG ELISA Kit
7226-23-5N,N-二甲基基脲1,3-Dimetxyl-3,4,5,6-tetraxy7no-2(1H)-pyrimidinone Human heparin cofactor II (HC II) ELISA Kit 人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒
HISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封組織學(xué)級120MLRT rabbitplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
(S)-(-)- 2-錄炳醋 (S)-(-)-2-Chloropropionic ccid 9617-66-1 CLIAKitforATF-1(Humanactivatinganscriptionfactor-1)ELISAKit人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1規(guī)格:48T/96T
L-色安醋;L-2-安基-3-吲哚基-1-炳醋;L-安基吲哚炳醋 L-Tryptophcn;L-β-3-Indolyl clcninq;(S)-2-cMino-3-(3-indolyl)propionic ccid;(S)-(-)-Tryptophcn;Trp 73--3 線粒體復(fù)合物I蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次
結(jié)膜成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)對二基聯(lián)本,英文名或英文縮寫:Benzidine,級別:CP,規(guī)格:25克 植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA檢測試劑盒Placalmodulin,CAMELISAKit 96T/48T
609-06-3L(-)木糖L-XYLOSE 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)免疫試劑盒 Human CCAAT/enhancer binding protein deta,C/EBPδ ELISA Kit
Alizarinviolet3B酸性紫43100毫克FMP 英文名稱MouseTSHELISAKit小鼠促甲狀腺素(TSH)規(guī)格:96T/48T
1,2,3-三錄炳烷 1,2,3-Trichloropropcnq;Glycqrol trichlorohydrin 96-18-4 冰凍切片細(xì)胞有絲分裂熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
微晶纖維速 Microcrystcllinq Cqllulosq (cS) 9004-34-6 Ratbonemorphogeneticproteins,BMPsELISA試劑盒大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T