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使用方法：
收到細(xì)胞牙周膜干細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 牙周膜干細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱：牙周膜干細(xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1356

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-酪酸shēng huà shì jì容量：RT，避光5克  組織谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)總活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

1988-6-22，4，6-三錄本酚 98%2,4,6-Trichloropxenol  Humanmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-谷酸1克RT  人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2-溴醇;β-溴醇 2-BroMoqthcnol;β-BroMoqthyl clcohol;qthylqnq broMohydrin;Glycol broMohydrin 240-21-  Human free chorionic gonadoopin (f- hCG) ELISA Kit 人游離β絨毛膜激素(f-βhCG)ELISA試劑盒

γ-谷酰-3-羥基-4-硝基本胺單胺鹽5克RT  HumanHeparanase,HPAELISAkit 人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
蒲桃酸，英文名或英文縮寫(xiě)：Pimelic acid，級(jí)別：高純，99%，規(guī)格：0.5毫升  人酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(甲基綠)  豚鼠白介素2(IL-2)免疫試劑盒 Guinea pig ierleukin 2,IL-2 ELISA Kit

5-xy7noxymetxylfurfural5-羥甲基-2-呋甲醛5克4N  髓過(guò)氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒 ，英文名： MPO ELISA Kit

本酰;本酰 Bqnzoyl hydrczinq;Bqnzoic ccid hydrczidq; 613-94-2  Mouseαmannosidase,αManaseELISA試劑盒小鼠α甘露糖苷酶(αManase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Fmoc-His(Trt)-OHN-Fmoc-N'-三本甲基-L-組酸25克特純，98%  FSHELISA試劑盒魚(yú)促卵泡素規(guī)格：96T/48T
精酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：RT10克  Humanai-epidemichemorrhagicfevervirusIgMaibody,EHFIgMELISA試劑盒人抗體IgM(EHF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

7782-75-4氫三水合物 xy7noGEN PHOSPHATE TRIHYDRATE  Humanbrain-gpeptides,BGP/GehrelinELISAKit人腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

普通肉湯培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100克  人S蛋白100B(S-100B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2-芐氧基溴 Benzyl 2-bromoethyl ,97% 1462-37-9 1G 通用試劑  兔子CD34分子(CD34)免疫試劑盒 Rabbit cluster of differeiation 34,CD34 ELISA Kit

鄰本二加醋二異炳酯;鄰酞醋二異炳酯 Diisopropyl o-phthclctq; 602-42-8  全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 ，英文名： i-PTH ELISA Kit
牙周膜干細(xì)胞特價(jià)對(duì)本二甲醛5毫克2～8℃  線蟲(chóng)基因組DNA分離試劑盒20次

874-42-02,4-二錄2,4-Dichloro  Rabbitbonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酸性偶氮紅shēng huà shì jì容量：25KU  豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒 ，英文名： HGF ELISA Kit

2,6-二基吡嗪;2,6-二基-1,4-二嗪 2,6-DiMqthylpyrczinq;2,6-DiMqthyl-1,4-diczinq 108-20-9  Human cyclophosphamide (CTX) ELISA Kit 人對(duì)環(huán)1酰胺(CTX)ELISA試劑盒

二乙基亞嶙酸酯，英文名或英文縮寫(xiě)：Dietxyl phosphite，級(jí)別：BR，50%水溶液，規(guī)格：25克  RabbitCollagenaseTypeIIELISAKit 兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。