產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | CE031 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | Human |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: HCT15/Fu價格
簡稱:人結氟尿嘧啶耐藥株
種屬:Human
來源:
培養(yǎng)基:1640+10%FBS+1%P/S +20ug/ml 5-FLU
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:CE031
使用方法:
收到細胞HCT15/Fu價格后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
無水氧化鋇,英文名或英文縮寫:Barium oxide,級別:CP,99%,規(guī)格:25克 HumanCalretinin,CRELISA試劑盒人鈣結合蛋白(CR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Paclobutrazol 10g/250g 國產(chǎn) 重組逆轉錄病毒穩(wěn)態(tài)表達細胞克隆凍存試劑盒50次
GENEPAGE6%EZSQUEEZE*CLDPAK*6% GENE-PAGE, 擠壓式瓶裝生物技術級5X75MLCOLD Humansolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
紫外光吸收劑UV-360 Bisoctrizolq 103297-42-1 小鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Alloxanmonohydrate阿脲一水合物25克CP Rat heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒
葡糖酸內酯shēng huà shì jì容量:100克 人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
CollagenaseV 100mg Sigma分裝 小鼠基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)免疫試劑盒 Mouse maix metalloproteinase 8/Neuophil collagenase,MMP-8 ELISA kit
5-胞苷二嶙酸單鈉鹽100克 乙酰輔酶A羧化酶合成酶(ACC)ELISA試劑盒 ,英文名: ACC ELISA Kit
cLLTqC-1000 MouseAmylinELISA試劑盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
松胞速B(-20℃) CYTOCHcLcSIN B 14930-96- ELISAKitCETP小鼠膽固醇酯轉移蛋白規(guī)格:48T/96T
結合珠蛋白,英文名或英文縮寫:Haptoglobin from pooled human plasma,級別:高純,50u/mg,規(guī)格:100克 人轉化生長因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒 Human TGF β2 ELISA Kit
肉湯瓊脂培養(yǎng)基Broth Agar Medium 硫嘌呤S-甲基轉換酶(TPMT)ELISA試劑盒 ,英文名: TPMT ELISA Kit
COLOREDLAEMMLISTACKINGGELSOLUTION濃縮膠溶液(帶顏色)蛋白組學級透明洋紅色液體RTsigma Ratbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISA試劑盒大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5-溴-2- 5-Bromo-2-fluoro,97% 93777-26-5 5G 通用試劑 HumanCollageypeⅠ,ColⅠELISA試劑盒人Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
阿米卡星/丁胺卡那霉素/阿米卡霉素/O-3-基-3-脫氧-alpha-D-葡糖基-(1→6)-O-(6-基-6-脫氧-alpha-D-葡糖基-(1→4)-N-(4-基-2-羥基-1-氧丁基)-2-脫氧-D-鏈霉胺鹽/Amikacin sulfate salt BR,674-786ug/mg 250/1000毫克 國產(chǎn)/進口 HumanErythropoietin,EPOELISAKit人紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HCT15/Fu價格靛藍胭脂紅shēng huà shì jì容量:5克 ELISAKitP-PKC人化蛋白激酶C規(guī)格:48T/96T
D-Galacturonicacid 5g/10g/25g原裝 Fluka 48280 小鼠CD34分子(CD34)ELISA試劑盒 ,英文名: CD34 ELISA Kit
酚酞二嶙酸四鈉鹽1克保存:-20℃ 大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA檢測試劑盒RatcoagulationfactorⅢ,FⅢELISAKit 96T/48T
姆沙伯 G NAW ChroMosorb G NcW; 人c-fos 免疫試劑盒 Human c-fos ELISA Kit
聚乙二醇 600 Poly(ethylene glycol) 600 (PEG 600) 25322-68-3 250G 通用試劑 英文名稱MouseDPP4ELISAKit小鼠二肽基肽酶IV(DPP4)規(guī)格:96T/48T