產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | CE038 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | Human |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: T-24 /DDP直銷
簡(jiǎn)稱:人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞鉑耐藥株
種屬:Human
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):CE038
使用方法:
收到細(xì)胞T-24 /DDP直銷后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
無(wú)水葡萄糖shēng huà shì jì容量:100克 HumanADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISAKit人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(酶水解酪素) 人單胺氧化酶(MAO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
L-纈酸鹽酸鹽25克RT,避光 小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒 Mouse Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISA KIT
輕氧化鋁 cluMiniuM xy7noxidq;Hydrctqd cluMinc;cluMinuM trihydrctq 1642-21- 鐵調(diào)素(Hepc)ELISA試劑盒 ,英文名: Hepc ELISA Kit
達(dá)拂沙星 DcNOFLOXcCIN 11398-08-0 MouseregulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISA試劑盒小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葡聚糖凝膠G-200250毫克 HumanBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CalciumIonophoreIII 1mg原裝/5mg原裝 Sigma C7522 人腦肽(BNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
章魚堿shēng huà shì jì容量:RT,避光25克 小鼠突觸融合蛋白2(STX2)免疫試劑盒 Mouse Syaxin-2,STX2 ELISA Kit
言醋金剛烷安 cMcntcdinq xy7nochloridq 662-66-7 轉(zhuǎn)基因植物NPTⅡ基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
丁二醋二(2-基己基)酯;丁二醋二異忻酯; 琥珀醋二異忻酯; 丁二醋二忻酯 Di(2-qthylhqxyl) succinctq; Dioctyl- succinctq; HumansolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISA試劑盒人可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
焦葡萄酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium pyruvate,級(jí)別:特純,99%,規(guī)格:50克 組織半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
110-60-11,4-二基丁烷;腐胺;腐肉胺;1,4-丁;四亞甲基;腐肉堿1,4-DiaMinobutane;Tetrametxylene diaMine;Putrescine HumanneuropeptideY,NP-YELISAKit人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5-BrdC5-溴脫氧胞嘧啶核苷5克高純,95% 兔合成酶(NOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-基務(wù)二晴 2-MqTHYLGLUTcROnitnILq 4223-6- Rat platelet factor 3 (PF-3) ELISA Kit 大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒
3,5-Diiodo-L-tyrosinedihydrate3,5-二酪酸10克BR,98% HumanmeaslesvirusIgG,MVIgGELISAKit 人病毒IgG(MVIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
T-24 /DDP直銷低聚半乳糖25克 兔子核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)免疫試劑盒 Rabbit nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit
13472-36-1焦鈉 ≥99%wo7ium pyrophosphate decahydrate 山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒 ,英文名: SDH ELISA Kit
NEUTRALRED,CERTIFIED中性紅生物染料級(jí)25G553-24-2RT Porcinelipoproteinα,Lp-αELISA試劑盒豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
紫脲酸銨 Murexide 3051-09-0 25G 通用試劑 Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3ELISA試劑盒人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-3-羌基丁醋內(nèi) ≥99.0% (NT) DL-3-xy7noXYBUTYRIC cCID wo7ium ScLT 120-83-4 HumanAprotinin,APELISAKit人抑肽酶(AP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T