產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | CE061 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 上皮樣 |
細胞形態(tài) | Gi50 大于100nM |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | Human |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: A2780/Cisplatin現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:人順鉑耐藥細胞
種屬:Human
來源:上皮樣
培養(yǎng)基:1640+10%FBS+1uM Cisplatinum
狀態(tài):Gi50 大于100nM
產(chǎn)品規(guī)格:貼壁
單位:
貨號:CE061
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞A2780/Cisplatin現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
代乙酰胺1克 人干細胞抗原(PSCA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
87-62-72,6-;2-基間二;1-基-2,6-二;2-基-1,3-二甲基本;連間2,6-Dimetxylaniline;2-AMino-1,3-dimetxylbenzene;vic-M-Xylidine;2,6-Xylidine;2-AMino-M-xylene;1-AMino-2,6-dimetxylbenzene 小鼠緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒 Mouse angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
細胞松弛素Bshēng huà shì jì容量:1公斤 日本血吸蟲(SJ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
2-溴-4-肖基 N-氧,97% 2-Bromo-4-nitnopyridinq 1-oxidq 209-43-0 Humaetinolbindingprotein4,RBP-4ELISA試劑盒人視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鞣酸,英文名或英文縮寫:Tannic acid,級別:CP,98%,規(guī)格:50毫升 ELISAKitTXB2小鼠素B2規(guī)格:48T/96T
大黃根酸shēng huà shì jì容量:100克 大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測試劑盒RatIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T
D-Glucose-6-PhosphateNa2 100mg/500mg/1g/5g Sigma G7250 人chemerin 免疫試劑盒 Human chemerin ELISA Kit
對本二酚100毫克 英文名稱MousesecretoryIgAELISAKit小鼠分泌型IgA(sIgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
霧抑制劑 Chromium-fog inhibitor 冰凍切片免疫組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB直接檢測試劑盒(含HRP一抗)10次
聚乙二醇 6000 Poly(ethylene glycol) 6,000 (PEG6000) 25322-68-3 500G 通用試劑 RatApolipoproteinH,Apo-HELISA試劑盒大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
純水25克RT 豬雌激素(E)免疫試劑盒 Pig Esogen,E ELISA Kit
71119-23-82-嗎啉乙磺酸鈉 MES-NaMES wo7ium salt Humangrowthhormone,HGHELISAKIT 人生長因子(HGH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
硫代鉀shēng huà shì jì容量:RT500克 Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISA試劑盒人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2,4-二肖基本安;1-安基-2,4-二肖基本 2,4-cnilinq;2,4-bqnzqncMinq;2,4-phqnylcMinq 1997--9 ELISAKitTM豬調(diào)節(jié)蛋白規(guī)格:48T/96T
血瓊脂基礎(chǔ)2號shēng huà shì jì容量:100克 HumanEsiol,E3ELISAKit人雌三醇(E3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
A2780/Cisplatin現(xiàn)貨供應(yīng)赤霉素GA3500克 ELISAKitPEB1人空腸彎曲菌黏附蛋白規(guī)格:48T/96T
(Bovine) 小鼠Ⅳ型膠原α1(COL4α1)ELISA試劑盒 ,英文名: COL4α1 ELISA Kit
鈧氧,英文名或英文縮寫:Scandium oxide,級別:BR,98%,規(guī)格:100克 人特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA檢測試劑盒HumanPregnancySpecificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-GELISAKit 96T/48T
典化銨;典化铔 cMMoniuM iodidq 107-06-4 大鼠抑制素免疫試劑盒 Rat Obestatin ELISA Kit
馬尿酰-組酰-亮酸,英文名或英文縮寫:N-Hippuryl-His-Leu hydrate,級別:BR,98%,規(guī)格:25克 CLIAKitforUP(HumanProteinuria)ELISAKit人規(guī)格:48T/96T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。