產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3672 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
歐洲棕色野兔綜合癥病毒PCR檢測試劑盒價格 | European Brown Hare Syndrome Virus(EBHSV)RTPCR | BKP3672 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:歐洲棕色野兔綜合癥病毒PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
人癌細胞;SK-BR-3 大鼠肝星形細胞完全培養(yǎng)基 100mLDMSO二甲亞砜5克色固,99%
C127 小鼠細胞三基十四烷溴化銨 Cqtrimidq 1119-97-7
FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-基馬尿酸鈉shēng huà shì jì容量:RT25克
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化)3Cprotease3C蛋白酶5克BR
IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 人細胞裂解液 (陽性對照) (4-錄-1-酚)
小香豬皮膚細胞;SSC-S2頭孢唑啉,唑啉頭孢菌素Cefazolin質量規(guī)格:>99%,BR
SPN Others Rat 大鼠 SPN / CD43 / Sialophorin 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢唑啉(標準品)Cefazolin質量規(guī)格:>99%,標準品
CL-0165NCI-H1299(人非小細胞細胞)5×106cells/瓶×2文多靈(標準品)Vindoline質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
L129細胞,NCTC克隆929細胞 人Butt`s瘤細胞,Raji細胞 小鼠小膠質細胞;BV2茶堿(標準品)Theophylline質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
AGS(人胃腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2苯甲酰新烏頭原堿(標準品)Benzoylmesaconine質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
歐洲棕色野兔綜合癥病毒PCR檢測試劑盒價格人成纖維細胞;HFFSB1317,TG02SB-1317,TG-02質量規(guī)格:>97%,CDKs/JAK2 / FLT3抑制劑
TGFBR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 人細胞裂解液 (陽性對照) PD0325901PD-0325901質量規(guī)格:>99%,ATP非競爭性的MEK抑制劑
F344大鼠骨髓間質干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells西他塞坦鈉/司他生坦鈉Sitaxsentan ; TBC-11249; Thelin質量規(guī)格:度99%
NW38細胞,人色素瘤細胞 鼠李糖乳桿菌 人神經(jīng)膠質細胞瘤細胞;U251西他塞坦鈉/司他生坦鈉Sitaxsentan ; TBC-11250; Thelin質量規(guī)格:度99%
ANGPT2 Protein Mouse 重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 (His 標簽)西他塞坦鈉/司他生坦鈉Sitaxsentan ; TBC-11251; Thelin質量規(guī)格:度99%
MCF-7 [MCF7], 人癌細胞系 牛胚氣管細胞,EB細胞 Hs 578T(人成纖維細胞)硅膠Hshēng huà shì jì容量:10KU
小鼠單核巨噬細胞;J774A.1姆沙伯 105 CHROMOSORB(R) 105 682-91-9
IL6R Others Mouse 小鼠 IL6RA / CD126 人細胞裂解液 (陽性對照) 聚聚酮 Poly(vinylpolypyrrolidone) [PVPP] 25249-54-1 100G 通用試劑
人T瘤轉基因細胞;Jurkat D,E二氧化鉑shēng huà shì jì容量:500毫克
BCAM Others Mouse 小鼠 BCAM 人細胞裂解液 (陽性對照) Dextrin 100g/500g原裝 Sigma D2131