產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3680 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
大擬片形吸蟲PCR檢測試劑盒價格 | Fasciola magnaPCR | BKP3680 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:大擬片形吸蟲PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
HCC 94 [HCC941122]人子宮鱗癌細胞(高分化) HCC 94 [HCC941122] in human uterine squamous cell carcinoma (high differeiation) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSVRBG瓊脂shēng huà shì jì容量:2~8℃25毫升
FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (His 標簽)喹乙醇 Olaquindox,98% 23696-28-8 5G 通用試劑
小鼠上皮細胞(MREpiC)(5×105) KM3, 人細胞 Human言醋屈嗪 Hydrclczinq xy7nochloridq 304-0-1
大鼠細胞;RH-35三偏嶙酸鈉500毫克
TPO Others Human 人 Thyroid peroxidase / TPO (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 951-77-92’-脫氧胞苷(+4℃)2'-Deoxycytidine monohydrate
小鼠樹突狀細胞細胞;DCS腺苷-5'-二1酸三鋰鹽ADP.Li3質量規(guī)格:>97%,BR
CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細胞裂解液 (陽性對照) 赤蘚醇;赤蘚糖醇Erythritol質量規(guī)格:>99%,BR
SK-N-BE(2)人神經母細胞瘤細胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS5ˊ-二1酸腺苷鋇鹽ADP.Ba質量規(guī)格:>98%,BR
TG-905細胞,人腦膠質母細胞瘤細胞 熒光假單胞菌 人滋養(yǎng)層絨毛細胞總RNAHVT NA二1酸腺苷單鉀鹽ADP.K質量規(guī)格:>97%,BR
RM1(大鼠肌肉成纖維樣細胞) 5×106cells/瓶×2肌苷-5'-二1酸二鈉鹽IDP.Na2質量規(guī)格:>98%,BR
大擬片形吸蟲PCR檢測試劑盒價格人癌細胞;MDA-MB-231頭孢克1Cefixime質量規(guī)格:>98%,BR
KLK3 Others Human 人 KLK3 / PSA / Kallikrein-3 人細胞裂解液 (陽性對照) NDSB 256(>98%,BR)NDSB 256質量規(guī)格:>98%,BR
MT-4 人急性母細胞細胞NDSB-211NDSB-211質量規(guī)格:BR
A-673 人橫紋肌瘤細胞 A-673 rhabdomyoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS中性紅染色液Neutral red solution(1X)質量規(guī)格:Ind Grade
TDGF1 Protein Human 重組人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標簽)鎳粉(>99.5%,SP)Nickel powder質量規(guī)格:>99.5%,SP
人胰腺腺泡上皮癌;HPAC1-溴-4-癸基苯(>88.0%(GC))質量規(guī)格:>88.0%(GC)1-Bromo-4-decylbenzene
IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-溴-4-十二烷基苯(>90.0%(GC))質量規(guī)格:>90.0%(GC)1-Bromo-4-dodecylbenzene
人細胞;Hela S3 [HeLaS3]1-溴-4-十二烷基苯(>95.0%(GC))質量規(guī)格:>95.0%(GC)1-Bromo-4-dodecylbenzene
TMED1 Others Human 人 TMED1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-溴-4-丁基苯(>95.0%(GC))質量規(guī)格:>95.0%(GC)1-Bromo-4-butylbenzene
人肝實質細胞完全培養(yǎng)基 100mL1-硝基芘(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)1-Nitropyrene
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。