產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3702 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 即森林病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Forest Encephalitis Virus(SFV)RTPCR
【貨號】: BKP3702
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
即森林病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
HA Others H2N2 甲型 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) APT瓊脂500毫升
人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]CBZ-L-異亮酸 Z-L-Isoleucine,98% 3160-59-6 5G 通用試劑
倉鼠腎細胞;HL-1 細胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細胞 3T3/Fas/com細胞,轉基因細胞皇嘌呤;皇減;6-氧嘌呤;6-羌基嘌呤 Hypoxcnthinq;Purinq-6 (1H)-onq 68-94-0
人胚腎細胞;293 [HEK-293]CupferronN-亞硝基本基羥胺鹽25克CP
ACPL2 Others Human 人 ACPL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 7695-91-2酚乙酸酯DL-ALPHA-TOCOPHEROL ACETATE PH EUR
小鼠成纖維細胞;φ2柚皮素(標準品)Naringenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標準品
CTSV Others Human 人 Cathepsin V / Cathepsin L2 人細胞裂解液 (陽性對照) 柚皮素Naringenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1藥根堿(標準品)Jatrorrhizine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.0%,標準品
ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 槲皮素 Quercetin dihydrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>85%,二水BR
Ke-3 人細胞槲皮素(標準品)Quercetin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.0%,標準品
即森林病毒PCR檢測試劑盒說明書CXCL16 Protein Rat 重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標簽)代森鋅Zineb質(zhì)量規(guī)格:>90%
PC-3(人細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FGFR3 人細胞裂解液 (陽性對照) 雷公藤堿(標準品)Wilforine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]新藤黃酸(標準品)Neogambogic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
19. 干細胞系統(tǒng)延齡草苷(標準品)Diosgenin glucoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
CM-R040大鼠肝竇內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mLN-反式-對香豆酰酪胺(標準品)N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠色素瘤細胞;B16鄰紅,英文名或英文縮寫:Cresol Red,級別:高,規(guī)格:25克
HEp-2細胞,喉表皮樣癌細胞 人食管鱗癌,KYSE70細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1(二基安基基)二茂絡鐵 (DIMqTHYLcMINO)TRIMqTHYLTIN 993-20-0
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-1A3隱色孔雀綠 LqUCOMcLcCHITq GRqqN 19-73-7
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) GLYCINE甘酸蛋白組學級1KG56-40-6RT
人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)109384-19-2N-Boc-4-羥基派啶N-BOC-4-xy7noxypipeni7ine
PCR檢測試劑盒:
即森林病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。