產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3721 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
壞死梭桿菌PCR檢測試劑盒直銷【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 壞死梭桿菌PCR檢測試劑盒直銷
【英文名稱】: Fusobacterium necrophorumPCR
【貨號】: BKP3721
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
壞死梭桿菌PCR檢測試劑盒直銷其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
SNU-739人細胞 SNU-739 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS微量可調移液器P2005克
IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽)5-溴代水楊醋 5-Bromosclicylic ccid 89-22-4
NCI-H226(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細胞)L-半胱酸鹽酸鹽10克RT,避光
NRK-52E,大鼠腎細胞EDTA,3NaN,N'-1,2-基雙[N-(羧甲基)-甘酸]三鈉鹽5克GR,99.5%
CD63 Others Sus scrofa (Pig) 野豬 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人細胞裂解液 (陽性對照) L-xy7noxyproline 1g/5g/10g/25g/100g原裝 Aldrich H54409
兔間變表皮鱗株;VX21丙基-β-D-吡喃半乳糖苷ALLYL-BETA-D-GALACTOPYRANOSIDE質量規(guī)格:>98%,BR
人上皮細胞(HPEpiC)(5×105)2-氨基環(huán)乙醇2-Aminocyclohexanol 質量規(guī)格:>98%,日本原裝進口
CL-0131KB(人口腔表皮樣癌細胞)5×106cells/瓶×2Y-27632.2HClY27632質量規(guī)格:>98%,ROCK1(p160ROCK) 選擇性抑制劑
人非小細胞細胞;NCI-H23 大鼠視網(wǎng)膜muller細胞 100mL靈芝酸A(標準品)Ganoderic acid A質量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品
A549/DDP 肺腺癌/順鉑耐藥株蝙蝠葛蘇林堿(標準品)Daurisoline質量規(guī)格:≥96%,標準品
角質細胞生長添加物KGS(S)-(-)-5'-芐氧基苯基卡維地洛(S)-(-)-5'-Benzyloxyphenyl Carvedilol質量規(guī)格:美國進口
CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細胞裂解液 (陽性對照) (R)-(+)-O-去甲卡維地洛(R)-(+)-O-Desmethyl Carvedilol質量規(guī)格:美國進口
大鼠氣管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL5-甲基吲哚(>98%,BR)5-Methylindole質量規(guī)格:>98%,BR
CRFK細胞,貓腎細胞 SK-HEP-1(人細胞) 獼猴肺細胞;MML25-硝基愈創(chuàng)木酚(植物激素級)5-Nitroguaiacol質量規(guī)格:>98%,植物激素級
NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標簽)6-溴-2-萘酚(>98%,BR)6-Bromo-2-naphthol質量規(guī)格:>98%,BR
壞死梭桿菌PCR檢測試劑盒直銷小鼠瘤細胞;P388D1(IL-1)噻乙酸,英文名或英文縮寫:2-Aminothiazol-4-acetic acid,級別:USP級,1603u/mg,規(guī)格:10KU
H9c2細胞,大鼠心肌細胞 人細胞,HepG2/2-15細胞 CL-0128JeKo-1(人套細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×23-(癸基二基銨)炳烷-1-磺醋內鹽 3-(Dqcyldimqthylczcniumyl)propcnq-1-sulfonctq 12163-36-7
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-GLYCEROL甘油蛋白組學級無色至幾乎無色粘稠液體RTsigma
CD38 Others Human 人 CD38 人細胞裂解液 (陽性對照) 磺丁基-β-環(huán)糊精,英文名或英文縮寫:Sulfobutyl-β-Cyclodextrin,級別:高,98%,規(guī)格:500U
破骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3240-34-4二乙酰氧基本(Diacetoxyiodo)benzene
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。