|
| 產地 | 進口、國產 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3759 |
| 用途 | 公司產品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
副雞嗜血桿菌PCR檢測試劑盒供應 | Haemophilus paragallinarumPCR | BKP3759 |
技術服務內容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：副雞嗜血桿菌PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
PRSS8 Others Mouse 小鼠 Prostasin / PRSS8 (aa 30-289) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 血清兔抗FITC1公斤RT
CL-0009769-P(人腎細胞腺癌細胞)5×106cells/瓶×23--1,2,4-三氮坐 1H-1,2,4-Triczolq-3-thiol
B16-F10, 小鼠色素瘤高轉移細胞 皮膚色素瘤細胞,SK-HEL-1細胞 HCCLM3(細胞)PIPESwo7iumSALTPIPES, Na*白色精細結晶粉末RTsigma
小鼠細胞(分泌促生長激素分泌激素);AtT-20L-HISTIDINEMONOxy7noCHLORIDEMONOHYDRATEL-組酸鹽酸鹽美國食品化學品法典級白色粉末RTsigma
FCGR1 Others Human 人 CD64 / FCGR1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 異亞丙基MESITYL OXIDE
人結直腸腺癌細胞;HCT-8 [HRT-18]三乙?；?/span>-β-環(huán)糊精(>97.0%(HPLC))Triacetyl-β-cyclodextrin質量規(guī)格：>97.0%(HPLC)
FGFRL1 Others Mouse 小鼠 FGFRL1 / FGFR5 人細胞裂解液 (陽性對照) 10,12-二十七二炔酸(>98.0%(GC))10,12-Heptacosadiynoic Acid質量規(guī)格：>98.0%(GC)
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A52,4-十七二炔酸(>95.0%(T))2,4-Heptadecadiynoic Acid質量規(guī)格：>95.0%(T)
BAMBI Others Mouse 小鼠 BAMBI / NMA 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,4-二十一二炔酸(>95.0%(T))2,4-Heneicosadiynoic Acid質量規(guī)格：>95.0%(T)
人胰腺上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL10,12-十七二炔酸(>97.0%(T))10,12-Heptadecadiynoic Acid質量規(guī)格：>97.0%(T)
副雞嗜血桿菌PCR檢測試劑盒供應小鼠前低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);MFC-B5-GFPN-十八烷酰-D-鞘氨醇N-Stearoyl-D-Sphingosine質量規(guī)格：美國進口
ALCAM Others Mouse 小鼠 ALCAM / CD166 人細胞裂解液 (陽性對照) N-去異丁基-N-丙基利福布汀N-Desisobutyl-N-propyl Rifabutin質量規(guī)格：美國進口
人表皮色素細胞-中色素裂解物HELM-m L25-去乙酰基利福噴汀25-Desacetyl Rifapentin質量規(guī)格：美國進口
CD83 Others Rat 大鼠 CD83 人細胞裂解液 (陽性對照) 利魯唑-13C,15N2Riluzole-13C,15N2質量規(guī)格：美國進口
人腦成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-羥基利魯唑N-Hydroxy Riluzole質量規(guī)格：美國進口
SL-7細胞，胚肺細胞 人上皮細胞,RWPE2細胞 人上皮細胞;MCF-10A聚乙酸酯shēng huà shì jì容量：RT50克
魚源細胞2,4,5-三拂本安 2,4,5-Trifluorocnilinq 367-34-0
DPP4 Others Human 人 DPPIV / DPP4 / CD26 人細胞裂解液 (陽性對照) 衛(wèi)矛醇半固體瓊脂shēng huà shì jì容量：2～8℃100毫升
人卵巢表層上皮細胞HOSEpiC緩沖MUG瓊脂shēng huà shì jì容量：25毫升
PVRL1 Others Rat 大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 112-12-92-十一(烷)酮2-Undecanone
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
