產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3843 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人病毒52PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Human Papillomavirus 52(HPV52)52 PCR | BKP3843 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
BC-021(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2銀試劑,英文名或英文縮寫:Rhodanine,級別:AR,規(guī)格:5克
HREpC-c 人腎上皮細(xì)胞(HREpC) 500,000cells 人小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞HM錄亞銥醋銨 cMMONIUM HqXcCHLOROIRIDcTq (III) HYDRcTq 9796-27-4
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞溶菌酶錄化物,英文名或英文縮寫:Lysozyme chloride,級別:高,1:10000,規(guī)格:5克
TGFB1 Others Mouse 小鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酰水楊酸100克
人正常上皮細(xì)胞;MCF 10A81-48-1硼試劑Solvent Violet 13
STXBP1 Others Human 人 STXBP1 / UNC18A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雙(標(biāo)準(zhǔn)品)Dichlorophene質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B6異丙凈(標(biāo)準(zhǔn)品)Dipropetryn質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
T/G HA-VSMC細(xì)胞,人主動脈平滑肌細(xì)胞 人胚肝細(xì)胞正常,QSG-7701細(xì)胞 CL-0064CoC1(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2異菌脲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)[3-(3,5-Dichlorophenyl)-2,4-dioxoimidazolidinyl]-N-(methylethyl)carboxamide standard solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0異氯1(標(biāo)準(zhǔn)品)Dicapthon質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
ALCAM Others Mouse 小鼠 ALCAM / CD166 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4,4'-滴滴滴(標(biāo)準(zhǔn)品) p, p’-DDD質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
人病毒52PCR檢測試劑盒供應(yīng)IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸頭孢噻呋(進(jìn)口)Ceftiofur hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells布立尼布Brivanib質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
SK-N-MC細(xì)胞,人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 蠟樣芽孢桿菌 人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞RNAHRGEC miRNA5 μg4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫(>98.0%(GC))4-Benzoyl 4'-Methyldiphenyl Sulfide質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
SF763(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×24,4'-雙(甲氨基)二苯甲酮(>98.0%(T))4,4'-Bis(methylamino)benzophenone質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
HCT 116(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0401NCI-H446(人小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-2,4'-二氯二苯甲酮(>99.0%(GC))2,4'-Dichlorobenzophenone質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
TP63 Others Human 人 P63 / TP63 / Tumor 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大豆蛋白胨shēng huà shì jì容量:100克
CM-R006大鼠完全培養(yǎng)基100mL流醋軟骨速酶AC(-20°C) CHONDROITIN cC LYcSq 9047-27-8
5637, 人細(xì)胞 蓖麻蠶卵細(xì)胞,NISE-Sacy-12細(xì)胞 TE 353.Sk(人正常皮膚細(xì)胞)十二烷基肌酸鈉 (... N-Lauroylsarcosine salt (BioXtr... 137-16-6 25G 通用試劑
小鼠腎足細(xì)胞;Mouse podocyteΦ35mm細(xì)胞培養(yǎng)皿shēng huà shì jì容量:2~8℃100克
TNFRSF17 Others Mouse 小鼠 BCMA / TNFRSF17 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DNAMarkerⅢ,High 10ug Gibco分裝
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:人病毒52PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。