產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3898 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
甲型病毒7亞型PCR檢測試劑盒說明書 | Influenza Virus AH7RTPCR | BKP3898 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:甲型病毒7亞型PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數(shù)據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
CLEC3B Others Mouse 小鼠 CLEC3B / Teanectin 人細胞裂解液 (陽性對照) BENZAMIDINExy7noCHLORIDE芐脒,HCl蛋白組學級白色精細結晶粉末COLDsigma
大鼠腦成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mLbeta-桉葉醇 ≥90% (HPLC)(+4`C) bqtc-qudqsmol 473-12-4
Super Tube狗腎細胞 Super Tube canine kidney cells D-MEM/F-12培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS酚紅 Phenol Red (pH indicator, cell culture... 143-74-8 5G 染色劑
IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Ierleukin-28B 蛋白 (His 標簽)苦楝素,英文名或英文縮寫:Toosendanin,級別:超,98%,規(guī)格:10毫克
NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-Swiss albino(胚胎成纖維細胞)(槐豆膠)
NCI-H358(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2硒吩(>98.0%(GC))Selenophene質量規(guī)格:>98.0%(GC)
CFPAC-1(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0102Hep 3B(人細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠腹水瘤細胞;S-1802,2',7,7'-四溴-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(T))2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]質量規(guī)格:>98.0%(T)
豚鼠肺細胞;GP-F11,3,6,8-四溴芘(>98.0%(T))1,3,6,8-Tetrabromopyrene質量規(guī)格:>98.0%(T)
人滑膜細胞(HS)( 5×105 )2,2',7,7'-四溴-9,9-聯(lián)亞芴基(>98.0%(HPLC))2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-bifluorenylidene質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
CL-0091HBL-100(人整合SV40基因的上皮細胞)5×106cells/瓶×2酞菁銅(II)(α-型)(>90.0%(T))Copper(II) Phthalocyanine (α-form)質量規(guī)格:>90.0%(T)
甲型病毒7亞型PCR檢測試劑盒說明書U-87 MG(人神經細胞) 5×106cells/瓶×2去甲埃羅替尼醋酸鹽Desmethyl Erlotinib Acetate質量規(guī)格:美國進口
HVMF-c 人類絨毛間質成纖維細胞(HVMF) 500,000cells 腎系膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)雙去甲埃羅替尼醋酸鹽Didesmethyl Erlotinib Hydrochloride Salt質量規(guī)格:美國進口
成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)6-羥基地氯雷他定6-Hydroxy Desloratadine質量規(guī)格:美國進口
PRELP Others Human 人 PRELP 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-羥基地氯雷他定3-Hydroxy Desloratadine質量規(guī)格:美國進口
人非小細胞細胞;NCI-H23地氯雷他定-d4Desloratadine-d4質量規(guī)格:美國進口
人胚;WI-38 [WI38]阿托伐他汀質量規(guī)格:美國進口Atorvastatin
DCN Others Human 人 Decorin / DCN / SLRR1B 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-羥基阿托伐他汀內酯質量規(guī)格:美國進口4-Hydroxy Atorvastatin Lactone
腎小管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)2-羥基阿托伐他汀內酯質量規(guī)格:美國進口2-Hydroxy Atorvastatin Lactone
IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-羥基阿托伐他汀內酯-d5質量規(guī)格:美國進口2-Hydroxy Atorvastatin Lactone-d5
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3阿齊沙坦質量規(guī)格:>99%,BRAzilsartan