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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3982 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
同豬嵴病毒梅拉哥病毒PCR檢測試劑盒說明書 | Menangle Virus（）RTPCR | BKP3982 |
技術(shù)服務內(nèi)容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：同豬嵴病毒梅拉哥病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
人浸潤性導管癌旁皮膚細胞;CCD-1095SkTESBUFFERTES試劑級500G7365-44-8RT
Caki-1細胞，人腎透明細胞癌細胞 綠猴猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞,RF/6A細胞 CL-0414PC-3M-IE8(人高轉(zhuǎn)移細胞株)5×106cells/瓶×2茴香腦 cnqtholq (cS) 4180/3/8
CRT(人神經(jīng)細胞) 5×106cells/瓶×2nitnofurantoin硝呋妥因10克超，99%
hMNC-PB-c pooledula-pure 人單核細胞，來自外周血，混合來源，超 人微內(nèi)皮細胞HCMEC復合基酸粉250毫克
GBC-SD, 人細胞apo-Transferrin 25mg/100mg/500mg原裝 Sigma T4382
HB611(人細胞) 5×106cells/瓶×2 成纖維細胞培養(yǎng)基FM十二水合硫酸鐵銨(>98%,BR)Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
腎系膜細胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)鉬酸銨四水Ammonium molybdate, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
ADRBK1 Others Human 人 GRK2 / ADRBK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1鉬酸銨(>96.5%,BR)Ammonium phosphomolybdate , hydrate質(zhì)量規(guī)格：>96.5%,BR
雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A121酸氫銨鈉(>98%,BR)Ammonium phosphate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
HUVEC細胞，人臍內(nèi)皮細胞 人肝細胞正常,HL-7702細胞 CL-0072Daudi(人瘤細胞)5×106cells/瓶×2丁二酸銨(>98%,BR)Ammonium succinate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
同豬嵴病毒梅拉哥病毒PCR檢測試劑盒說明書HS 683(人腦細胞) 5×106cells/瓶×2 生孢梭菌肌苷-5'-三1酸三鈉鹽ITP?Na3質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
滑膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鳥苷-5'-三1酸二鈉鹽GTP.Na2質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
CNDP2 Others Mouse 小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 4,4'-二正辛氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N))4,4'-Di-n-octyloxyazoxybenzene質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(N)
人髓母細胞瘤細胞;Daoy4,4'-二壬氧基氧化偶氮苯4,4'-Dinonyloxyazoxybenzene質(zhì)量規(guī)格：
HMy2.CIR細胞，人B母細胞 人細胞,H7402細胞 CL-0200RWPE1(人上皮細胞)5×106cells/瓶×24'-(反-4-戊基環(huán)己基)二苯基-4-甲腈(>98.0%(GC))4'-(trans-4-Amylcyclohexyl)biphenyl-4-carbonitrile質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
PRLR Others Human 人 PRLR / Prolactin Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 3,4-二羥基本酸100毫克
人內(nèi)根殼細胞總RNAHHIRSC NA對基-α-D-吡... 4-Nitrophenyl α-D-galactopyranoside 7493-95-0 100MG 通用試劑
VEGFA Others Rat 大鼠 VEGF164 / VEGFA 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1 JP-TS cVIcTION FUqL 6474-47-8
中國倉鼠卵巢細胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-偶氮脒類引發(fā)劑V401克2～8℃
NCI-H460[H460]細胞，大細胞細胞 人,H4細胞 小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/322，4-二硝基扶本(劇毒)(陰涼)2,4-fluorobenzene
反應五要素：
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
