產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4080 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
微黃細頸線蟲PCR檢測試劑盒價格 | Nematodirus helvetianusPCR | BKP4080 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:微黃細頸線蟲PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
LS 180(人腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2化鎘,英文名或英文縮寫:Cadmium iodide,級別:CP,98.5%,規(guī)格:25克
HHpC-c 人肝細胞(HHpC) 3-6 mio. 人平滑肌細胞HBSMC2-安基嘌呤(2-8℃) ≥99% 2-cminopurinq 42-06-
H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源)5-(2-羧基本基)-1-(2-羥基-5-磺基本基)-3-本基甲單鈉鹽,英文名或英文縮寫:on,級別:BR,0.15%,規(guī)格:250毫克
CDK1 Others Human 人 CDC2 Kinase / CDK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-甲狀腺素鈉5克RT
人胚;WI-38 [WI38]Aprotinin 2mg/5mg/10mg/100mg原裝 Roche11583794001
CDC42BPB Others Human 人 CDC42BPB 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 雙嘧達莫(標準品)Dipyridamole質量規(guī)格:含量測定
人正常基質永生化細胞;WPMY-1羧甲司坦(標準品)S-Carboxymethyl-L-cysteine質量規(guī)格:含量測定
P388D1細胞,瘤細胞 人腺癌細胞,HCT-8細胞 CM-H020人胰島β細胞完全培養(yǎng)基100mL硝酸異山梨酯(標準品)Isosorbide dinitrate質量規(guī)格:含量測定
大鼠骨骼肌成肌細胞;L6月桂氮卓酮;氮酮Laurocapram質量規(guī)格:>97%
VSIG4 Others Mouse 小鼠 VSIG4 人細胞裂解液 (陽性對照) (標準品) 質量規(guī)格:含量測定
微黃細頸線蟲PCR檢測試劑盒價格PRAP1 Others Human 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-甲氧基酚(4-Methoxyphenol質量規(guī)格:>98%,BR
人細胞;1301對甲基肉桂酸(>98%,BR)4-Methylcinnamic acid質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1 神經上皮瘤細胞,SK-N-MC細胞 MPC細胞,小鼠垂體細胞4,5-二氟酞腈(>95.0%(GC))4,5-Difluorophthalonitrile質量規(guī)格:>95.0%(GC)
HT-29, 人細胞 Human4-己氧基苯二甲腈(>95.0%(GC))4-Hexyloxyphthalonitrile質量規(guī)格:>95.0%(GC)
CD200R1 Others Mouse 小鼠 CD200R1 / OX-2R 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-羥基鄰苯二甲腈(>97.0%(GC))4-Hydroxyphthalonitrile質量規(guī)格:>97.0%(GC)
人肺微內皮細胞cDNAHPMEC cDNA4-nitnoacetanilide對硝基乙酰本胺1克高,98%
GSK3B Others Mouse 小鼠 GSK3B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N,N-二基酰安二異炳基縮全 95% 1,1-Diisopropoxytrimqthylcminq 18203-89-4
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4醋錳98% McNGcNqSq(II) cCqTcTq 638-38-0
TE-11細胞,細胞 人細胞,CaEs-17細胞 大鼠胰腺外分泌腺細胞;AR42J六水錄化鍶,英文名或英文縮寫:Strontium chloride hexahydrate,級別:CP,98.5%,規(guī)格:25克
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B256-41-7L-酸L-Alanine;(S)-2-AMinopropionic acid;L-2-AMinopropionic acid
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。