產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4378 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
溶血葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | Staphylococcus haemolyticus PCR | BKP4378 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
7-Oxo-β-sitosterol 中文名:7-氧代-β-谷甾醇 分子式:C29H48O2 己糖激酶(HK)測(cè)定試劑盒(測(cè)組織、血清)(紫外比色法)
7-Methoxy-1-tetralinone 中文名: 分子式:C11H12O2 激酶(PK)測(cè)定試劑盒(測(cè)組織、血清)(紫外比色法)
7-Methoxy-1-naphthaleneacetic acid 中文名: 分子式:C13H12O3 乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶 英文名稱: Rat acetylansferase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ChAT
7-Keto-dehydroepiandrosterone 中文名:7-酮基去氫表雄酮 分子式:C19H26O3 大鼠降鈣素 英文名稱: calcitonin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CAL
7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one 中文名: 分子式:C10H10ClNO 大鼠環(huán)0酸腺苷 英文名稱: cyclic adenosine monophosphate 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CAMP
兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5'-Deoxy-5-fluorocytidine 中文名: 分子式:C9H12FN3O4
兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid 24065-33-6 中文名: 分子式:C5H3ClO2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISAKit ELISA. 96T/48T 6-Hydroxyrubiadin 中文名:6-羥基甲基異茜草素 分子式:C15H10O5 度:97.5%
兔性因子(rabbit VWF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Chloro-2-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C7H4ClNO4 度:98.0%
兔細(xì)胞粘附分子-1(rabbit VCAM-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile 147619-40-7 中文名: 分子式:C7H5ClN2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
溶血葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書MelanoFectagen? 色素細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒普盧利沙星;普利沙星質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRPrulifloxacin
牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1) 人細(xì)胞,NCI-N87細(xì)胞 NS-1細(xì)胞,小鼠細(xì)胞普盧利沙星;普利沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Prulifloxacin
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞(彝族);KM9345-HIAA;5-羥基吲哚-3-乙酸(血清素代謝物)質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,進(jìn)分5-HIAA
SLAMF7 Others Human 人 SLAMF7 / CRACC / CD319 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 頭孢地嗪酸;頭孢地嗪酸質(zhì)量規(guī)格:>90%,BRCefodizime acid
CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2右美沙芬-d3質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Dextromethorphan-d3
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3E5 中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL沙門氏志賀氏屬瓊脂培養(yǎng)基5克RT
THP-1人單核細(xì)胞 Human側(cè)金盞花醇;啊東糖醇;務(wù)五醇;福壽草醇;側(cè)金盞(務(wù))糖醇;核糖醇 cdonitol;Ribitol 488-81-3
CNAP2 Others Mouse 小鼠 CNAP2 / CASPR2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4--1-酚 4-Chloro-1-naphthol (≥98%, 4CN) 604-44-4 5G 核酸衍生物
人成纖維細(xì)胞RNAHPrF miRNA5 μgformide,DEIONIZED去離子甲先胺超級(jí)無色微粘稠液體COLDsigma
BLNK Others Human 人 BLNK 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Fluorescein2Na 25g/100g/500g 原裝 Amresco 0577
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:溶血葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。