產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4382 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
路鄧葡萄球菌PCR檢測試劑盒說明書 | Staphylococcus lugdunensisPCR | BKP4382 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:路鄧葡萄球菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione 1265908-20-0 中文名: 分子式:C28H40O3 度:% 關(guān)鍵詞: ; 麥角甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol 1207441-49-3 中文名: 分子式:C29H46O3 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISAKit ELISA. 96T/48T
7α-Hydroxystigmasterol 64998-19-2 中文名:7α-羥基豆甾醇 分子式:C29H48O2 度:% 關(guān)鍵詞: 狼毒; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
7α-Hydroxysitosterol 34427-61-7 中文名:7α-羥基谷甾醇 分子式:C29H50O2 度:95.0% 關(guān)鍵詞: 甘蔗; 菠蘿; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠可溶性 P- 選擇素 (mouse sP-Selectin/ sCD62P) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
7-Oxo-β-sitosterol 2034-74-4 中文名:7-氧代-β-谷甾醇 分子式:C29H48O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 抗; 松屬; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠轉(zhuǎn)化生長因子 -β1 (mouse TGF-β1) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
兔氧化抗體(OLAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7 度:98.0%
兔氧化抗體(OLAb)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal 中文名: 分子式:C21H32O3
兔氧化 英文名稱: Rabbit oxidized Low Density Lipoprotein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: oxLDL Pemetrexed 137281-23-3 中文名:培美曲塞二鈉 分子式:C20H21N5O6
兔血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7
兔血小板衍化生長因子(rabbit PDGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 5-Fluorouracil 中文名: 分子式:C4H3FN2O2 度:98.0%
路鄧葡萄球菌PCR檢測試劑盒說明書MDBK (NBL-1)牛腎細胞 MDBK (NBL-1) of bovine kidney cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS維生素 D3 ((膽骨化醇)質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)4000萬IU/gVitamin D3
IL18 Protein Mouse 重組小鼠 IL18 / IL-18 蛋白帕唑帕尼鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng) Pazopanib HCl
NCI-H524(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 MCF7(癌細胞)噻托溴銨質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,無水物Tiotropium bromide anhydrous
CL-0440SK-MEL-1(人皮膚色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2氨標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:水)質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:水Ammonia solution
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細胞裂解液 (陽性對照) 酰嘧磺?。?biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Amidosulfuron
MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白 (His 標(biāo)簽)4,4'-二氯二苯砜(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)4,4'-Dichlorodiphenyl Sulfone
人胚胎胰腺組織來源細胞;CCC-HPE-2 人平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL雙[3,5-二溴-4-(2-羥乙氧基)苯基]砜(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)Bis[3,5-dibromo-4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone
人羊膜細胞;WISH雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]砜(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone
人肺動脈成纖維細胞 (HPAF)( 5×105 )二苯砜-3,3'-二磺酸二鈉鹽(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)Diphenylsulfone-3,3'-disulfonic Acid Di Salt
CL-0317AML-193(人急性單核細胞單核細胞)5×106cells/瓶×25,10-二氫-5,10-二甲基吩嗪(>98.0%(GC)(N))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N)5,10-Dihydro-5,10-dimethylphenazine