產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4509 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
解脲脲原體PCR檢測試劑盒直銷 | Ureaplasma urealyticumPCR | BKP4509 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:解脲脲原體PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Bis[4-(dimethylamino)phenyl]methane 中文名:雙[4-(二甲氨基)苯基]甲烷 分子式:C17H22N2 度:98.0% 小鼠雌激素(E)ELISAKit ELISA. 96T/48T
2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid 中文名:2,2-二羥甲基丁酸 分子式:C6H12O4 度:98.0% 小鼠白介素-6(mouse IL-6) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene 中文名:1,3-雙(4,5-二氫-2-惡唑)苯 分子式:C12H12N2O2 度:98.0% 小鼠白介素-7(mouse IL-7) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 中文名:4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚 分子式:C18H20O2 度:98.0% 小鼠白介素-8(mouse IL-8) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
2,2'-Dithiobisbenzanilide 中文名:2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫 分子式:C26H20N2O2S2 度:98.0% 小鼠白介素-9(mouse IL-9) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
小鼠(NO)ELISAKit ELISA. 96T/48T N-(2-methyl-4-oxopentan-2-yl)-sulfamethoxazole 中文名: 分子式:C16H21N3O4S 度:98.0%
小鼠(mouse NO) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Imidazo[1,2-b]pyridazine 中文名: 分子式:C6H5N3
小鼠 IgG(mouse IgG) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 ADI Azilsartan 147403-03-0 中文名:阿齊沙坦 分子式:C25H20N4O5 度:98.0% 關鍵詞:
小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA Kit 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D Azathioprine 中文名:硫唑嘌呤 分子式:C9H7N7O2S 度:98.0%
小鼠 ACTH(mouse ACTH) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 Phoenix Otophylloside F 250217-73-3 中文名:青陽參苷F 分子式:C48H76O16 度:95.0% 關鍵詞: 抗; 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
解脲脲原體PCR檢測試劑盒直銷HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2比阿培南(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Biapenem
hMSC-AT-c 人類脂肪組織間質(zhì)干細胞(hMSC-AT) 500,000cells 小鼠背脊髓神經(jīng)元MN-dsc膽紅素(標準品)質(zhì)量規(guī)格:UV≥98%,標準品Bilibubin
CL-0462UMR-106(大鼠細胞)5×106cells/瓶×2保泰(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品phenylbutazone
HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 保泰鈣質(zhì)量規(guī)格:>98%phenylbutazone Calcium
人髓核細胞RNAHNPC miRNA5 μg保泰鈉質(zhì)量規(guī)格:>98%phenylbutazone
SOST Others Rat 大鼠 SOST / Sclerostin 人細胞裂解液 (陽性對照) 依魯替尼(PCI32765)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BTK抑制劑Ibrutinib,PCI-32765
人張氏肝細胞;Chang liver右旋蘭索拉唑(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標準品(R)-Lansoprazole
IL17RC Others Human 人 IL17RC (aa 1-454) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 右旋蘭索拉唑質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR(R)-Lansoprazole
恒河猴腎細胞;RM-3樂伐替尼質(zhì)量規(guī)格:>98%,VEGFR抑制劑Lenvatinib(E7080)
HuT78細胞,T細胞細胞 惡性色素瘤,A375細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;HH-015-硝基吲哚(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)5-Nitroindole
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。