產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4550 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 黃熱病病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Yellow Fever Virus(YFV)RTPCR
【貨號】: BKP4550
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
黃熱病病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
Cholesterol 57-88-5 中文名:膽固醇 分子式:C27H46O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Chlorpheniramine maleate 113-92-8 中文名:馬來酸氯苯那敏 分子式:C20H23ClN2O4 度:98.0% 小鼠β基己糖苷酶A(β-HexA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Chlorotetracycline 57-62-5 中文名:金霉素 分子式:C22H23ClN2O8 度:98.0% 小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Chlorogenic acid 327-97-9 中文名:綠原酸 分子式:C16H18O9 度:98.0% 關(guān)鍵詞: *; 抗氧化; 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Chlorhexidine acetate 56-95-1 中文名:醋酸氯己定 分子式:C26H38Cl2N10O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Bi-linderone 1227375-09-8 中文名: 分子式:C34H32O10
小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISAKit ELISA. 96T/48T Methyl (3R)-3-(tert-butyldimethylsilyloxy)-5-oxo-6-triphenylphosphoranylidenehexanoate 147118-35-2 中文名: 分子式:C31H39O4PSi 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠α1酸性糖蛋白elisa試劑盒 小鼠α1酸性糖蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠α1酸性糖蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠α1酸性糖蛋白試劑盒、小鼠α1酸性糖蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Bindone 1707-95-5 中文名:雙茚二酮 分子式:C18H10O3
小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Bezafibrate 中文名:苯扎貝特 分子式:C19H20ClNO4 度:98.0%
小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Estradiol heptanoate 4956-37-0 中文名:庚酸雌二醇 分子式:C25H36O3
HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) N-三苯甲基羧酸洛沙坦質(zhì)量規(guī)格:美國進口N-Trityl Losartan Carboxylic Acid
CL-0270CRT(人神經(jīng)細胞)5×106cells/瓶×2O-乙酰洛沙坦質(zhì)量規(guī)格:美國進口O-Acetyl Losartan
KB-C1.5細胞,細胞 人T瘤轉(zhuǎn)基因細胞,Jurkat D,E細胞 人上皮細胞;Hep-2洛沙坦N2-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口Losartan N2-Glucuronide
769-P(人腎細胞腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2洛沙坦質(zhì)量規(guī)格:美國進口Losartan
ACVRL1 Others Rat 大鼠 ALK-1 / ACVRL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 洛匹那韋代謝產(chǎn)物M-3/M-4質(zhì)量規(guī)格:美國進口Lopinavir Metabolite M-3/M-4
黃熱病病毒PCR檢測試劑盒說明書MIApaca-2細胞,人細胞 人成纖維細胞,HT1080細胞 615小鼠瘤株;HP615DCCIN,N-二環(huán)己基碳1克AR,99%
HuH-6(人肝母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2流醋鈰;流醋鈰銨 CqRIUM(IV) SULFcTq TqTRcHYDRcTq 1094-4-2
Promocell C-22010 Endothelial Cell Growth Medium, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml2,5-二本惡唑shēng huà shì jì容量:500毫升
人骨骼肌細胞裂解物HSkMCLAMMONIUMOXALATEMONOHYDRATE草酸*500G6009-70-7RT
PRKCD Others Mouse 小鼠 PKC delta / PRKCD 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (8-羥基)
PCR檢測試劑盒
黃熱病病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。