產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4528 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
擬態(tài)弧菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Vibrio mimicusPCR | BKP4528 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:擬態(tài)弧菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Candesartan ethyl ester 中文名: 分子式:C26H24N6O3 豬載脂蛋白A1elisa試劑盒 豬載脂蛋白A1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬載脂蛋白A1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬載脂蛋白A1試劑盒、豬載脂蛋白A1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Candesartan cilexetil 中文名:坎地沙坦西來替昔酯 分子式:C33H34N6O6 豬主要急性期蛋白elisa試劑盒 豬主要急性期蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬主要急性期蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬主要急性期蛋白試劑盒、豬主要急性期蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Candesartan 中文名:坎地沙坦 分子式:C24H20N6O3 豬上腺素elisa試劑盒 豬上腺素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬上腺素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬上腺素試劑盒、豬上腺素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Campsiketalin 中文名: 分子式:C10H20O4 豬沙門氏菌抗體elisa試劑盒 豬沙門氏菌抗體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬沙門氏菌抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬沙門氏菌抗體試劑盒、豬沙門氏菌抗體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Cabozantinib 中文名:卡博替尼 分子式:C28H24FN3O5 豬熱休克蛋白90elisa試劑盒 豬熱休克蛋白90試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬熱休克蛋白90試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬熱休克蛋白90試劑盒、豬熱休克蛋白90eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠B因子(BF)ELISAKit ELISA. 96T/48T Indapamide 26807-65-8 中文名:吲達(dá)帕胺 分子式:C16H16ClN3O3S
小鼠B細(xì)胞瘤因子elisa試劑盒 小鼠B細(xì)胞瘤因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠B細(xì)胞瘤因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠B細(xì)胞瘤因子試劑盒、小鼠B細(xì)胞瘤因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Benzo-15-crown 5-ether 14098-44-3 中文名:苯并-15-冠5-醚 分子式:C14H20O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠B細(xì)胞刺激因子(mouse BAFF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Methylprednisolone acetate 53-36-1 中文名:甲基潑尼松龍醋酸酯 分子式:C24H32O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠B細(xì)胞刺激因子 英文名稱: B lymphocyte stimulator 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: BAFF Dehydroepiandrosterone 中文名:脫氫表雄酮 分子式:C19H28O2
小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Benzimidazole 51-17-2 中文名:苯并咪唑 分子式:C7H6N2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
擬態(tài)弧菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格Hep 3B(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27,人,小鼠,綿羊,豬,大鼠PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
AGRP Others Human 人 AgRP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27(6-27),人,雞,小鼠,豬,大鼠PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人角膜上皮細(xì)胞HCEpiC垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(16-38),人,雞,小鼠,綿羊,豬,大鼠PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽相關(guān)肽(1-29),大鼠PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
HMy2.CIR 人 B 母細(xì)胞胰多肽,人Pancreatic Polypeptide,human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細(xì)胞2′-脫氧肌苷-5′-單嶙酸二鈉鹽shēng huà shì jì容量:RT1克
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL3DL-3-醇 3-Pyrrolidinol 40499-83-0
CNE1, 人細(xì)胞系1,6-己二醇shēng huà shì jì容量:100克
人纖維細(xì)胞;HT-1080 大鼠腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLMaltose飴糖100U高,98%
腦內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)甲基叔丁基tert-Butylmetxyl
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。