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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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小反芻獸疫病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P63702
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-24
  • 更新日期: 2025-01-08
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P63702
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

小反芻獸疫病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63702

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 7,6,54,32。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  N6-Benzoyladenine  中文名:N6-苯甲?;汆堰?span>  分子式:C12H9N5O 

小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Cleroindicin C  中文名:  分子式:C8H12O3  度:%

小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  cis-Octahydro-isoindole  中文名:  分子式:C8H15N  度:98.0%

小鼠促甲狀腺素   英文名稱:   Mouse Thyroid Stimulating Hormone   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   TSH  Metoclopramide  中文名:甲氧氯普胺  分子式:C14H22ClN3O2 

小鼠促黃體生成激素(mouse LH)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  Cleroindicin B  107389-91-3  中文名:  分子式:C8H14O3  度:96.0%  關(guān)鍵詞:  紅波羅花; 長管大青; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
CD40 Others Rat 大鼠 CD40 / TNFRSF5 細胞裂解液 (陽性對照) N-(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉TAPS  Salt質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

Wistar大鼠*間質(zhì)干細胞 Wistar rat bone marrow mesenchymal stem cellsTAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T))TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(T)

SH-SY5Y細胞,神經(jīng)上皮瘤細胞 粘質(zhì)沙雷氏菌 肝細胞RNAHH miRNA5 μg二甲基偶氮磺IIIDimethylsulfonazo III質(zhì)量規(guī)格:堿性稀土金屬用的分光光度試劑及硫酸根用鋇的沉淀滴定指示劑

SK-CO-1(結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2偶氮磺III(>90.0%(HPLC))Sulfonazo III 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC)

HCT-8(盲腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0402NCI-H520(肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細胞;MMK32-(4-磺基苯偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸三鈉鹽水合物(>95.0%(HPLC))3 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
IL17RD Others Canine 狗 IL17RD 細胞裂解液 (陽性對照) 溴化鉀(光譜SP)Potassium bromide質(zhì)量規(guī)格:光譜SP

大鼠細胞;UMR-106偶氮胂Ⅰ水合物(90%)Arsenazo I Hydrate質(zhì)量規(guī)格:0.9

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1 舌鱗癌細胞,Tca-8113細胞 MADB106細胞,大鼠腺癌細胞系無水硫酸鈉(SP) sulfate anhydrous質(zhì)量規(guī)格:SP

胚胎氣管組織來源細胞;CCC-HBE-2二甲基砜(核磁共振定量標準品)Dimethyl sulfone質(zhì)量規(guī)格:核磁共振定量標準品

PECAM1 Others Mouse 小鼠 PECAM1 / CD31 細胞裂解液 (陽性對照) 1,3-(標準品)1,3-Propanediol質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic acid  104239-97-6  中文名:  分子式:C19H28INO3  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(mouse TIMP-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝

2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester  124111-47-3  中文名:  分子式:C26H52O3  度:98.0%  關(guān)鍵詞:  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2(mouse TIMP-2)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝

2-Hydroxyquinoxaline  1196-57-2  中文名:  分子式:C8H6N2O  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠壞死因子-a(mouse TNF-a)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝

2-Hydroxy-3-methylanthraquinone  17241-40-6  中文名:  分子式:C15H10O3  度:關(guān)鍵詞:  白花蛇舌草; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠壞死因子-b(mouse TNF-b)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  

2-Flurbiprofen  51543-40-9  中文名:氟比洛芬  分子式:C15H13FO2  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小反芻獸疫病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

 

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