產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P63664 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
豬鏈球菌Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63664 |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISAKit ELISA. 96T/48T L-(+)-Arginine 74-79-3 中文名:L-(+)-精氨酸 分子式:C6H14N4O2
小鼠癌標(biāo)志物elisa試劑盒 小鼠癌標(biāo)志物試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠癌標(biāo)志物試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠癌標(biāo)志物試劑盒、小鼠癌標(biāo)志物elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Neochlorogenic acid methyl ester 123410-65-1 中文名:新綠原酸甲酯 分子式:C17H20O9 度:97.5% 關(guān)鍵詞:
小鼠癌標(biāo)志物elisa試劑盒 小鼠癌標(biāo)志物試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠癌標(biāo)志物試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠癌標(biāo)志物試劑盒、小鼠癌標(biāo)志物elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Buergerinin G 263764-83-6 中文名: 分子式:C9H12O4 度:% 關(guān)鍵詞: 北玄參; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
小鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Bromhexine 611-75-6 中文名:鹽酸溴己新 分子式:C14H21Br2ClN2 度:98.0%
小鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISAKit ELISA.
96T/48T Brinzolamide 138890-62-7 中文名:布林佐胺 分子式:C12H21N3O5S3
M14(色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 顱蓋造骨細(xì)胞Many
types of cells包裝:5 × 105方(1ml)6-(γ,γ-二甲基1丙基氨基)嘌呤核苷(植物激素級(jí))6-Dimethylallylamino purine riboside質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物激素級(jí)
角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)添加物(不含動(dòng)物成分)KGS-acf6-甲基(>98%,BR)6-Methylcoumarin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IFNA5 Others Mouse 小鼠 IFNA5 / IFNaG 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5-甲基胞嘧啶 5-methylcytosine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY10027-乙基喜樹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)7-Ethylcamptothecin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠腦細(xì)胞;C6 細(xì)胞,OS-RC-2細(xì)胞 OK細(xì)胞,負(fù)鼠腎細(xì)胞7-乙基喜樹堿7-Ethylcamptothecin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
HMGB1 Others Human HMGB1 / HMG1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 外消旋噻嗎洛爾-d5 馬來酸鹽rac Timolol-d5 Maleate質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
體外管腔形成分析試劑盒IVTFA外消旋馬來酸噻嗎洛爾rac Timolol Maleate質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
STAT1 Others Human STAT1 / p91 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (R)-(+)-馬來酸噻嗎洛爾(R)-(+)-Timolol Maleate質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
非小細(xì)胞;NCI-H157(S)-(-)-馬來酸噻嗎洛爾(S)-(-)-Timolol Maleate質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
RH-35細(xì)胞,細(xì)胞 胃腺癌細(xì)胞,AGS細(xì)胞
黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2替硝唑標(biāo)記d4Tinidazole Labeled
d4質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
(S)-(+)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone 101711-78-8
中文名:(S)-(+)-4-芐基-3-丙酰-2-惡唑烷酮 分子式:C13H15NO3 度:98.0% 小鼠組織因子 英文名稱: tissue factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TF
(S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol 78606-95-9 中文名:(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇 分子式:C17H21NO 度:99.0% 小鼠高遷移率族蛋白 英文名稱: High Mobility Group Box protein 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: HMGB1
(R,E)-Deca-2-ene-4,6-diyne-1,8-diol 931116-24-4 中文名: 分子式:C10H12O2 度:% 關(guān)鍵詞: 聚乙炔; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶 英文名稱: Mouse 3-hydroxy-3-methylglaryl CoA reductase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: HMG-CoA
(R)-4-Methoxydalbergione 4646-86-0 中文名:(R)-4-甲氧基黃檀醌 分子式:C16H14O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 抗菌; ; 巴西黑黃檀; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠白介素-6 英文名稱: ierleukin-6 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IL-6
豬鏈球菌Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)(R)-4-Benzyl-2-oxazolidinone 102029-44-7 中文名:(R)-4-芐基-2-惡唑烷酮 分子式:C10H11NO2 度:98.0% 小鼠白介素-7 英文名稱: ierleukin-7 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IL-7