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本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF 肥大細胞瘤細胞，P815細胞 INS-1細胞，大鼠胰島素細胞去甲基雷諾嗪Desmethyl Ranolazine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP雷諾嗪-d3Ranolazine-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進口

STIM1 Others Human  STIM1 / GOK 細胞裂解液 (陽性對照) 雷諾嗪Ranolazine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)去甲基雷諾嗪β-D-葡萄糖苷酸Desmethyl Ranolazine β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

EPHB1 Others Human  EPHB1 / EPHT2 細胞裂解液 (陽性對照) (R)-鹽酸樂卡地平(R)-Lercanidipine 質(zhì)量規(guī)格：美國進口
海馬神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)正十六烷(Standard for GC,>99.5%(GC))Hexadecane質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.5%(GC)

PTN Others Mouse 小鼠 Pleioophin / PTN / HB-GAM 細胞裂解液 (陽性對照) 正十六烷(分析標準品,≥99.5%(GC))Hexadecane質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,≥99.5%(GC)

大鼠內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL2-萘磺酸鈉(>98%,BR)-2-naphthalenesolfonate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

RBL-2H3大鼠嗜堿性細胞細胞 RBL-2H3 rat neuophils alkaline cell leukemia MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+15%熱滅活FBS司班20Span* 20質(zhì)量規(guī)格：BR

IFNA2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 蛋白 (His 標簽)全染色劑(>95%,BS)Stains-All質(zhì)量規(guī)格：>95%,BS
上皮細胞生長添加物MEpiCGS羥基脲Hydroxyurea/Hydroxycarbamide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

MAP2K6 Others Human  MKK6 / MEK6 / MAP2K6 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 羥基脲（標準品）Hydroxyurea/Hydroxycarbamide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

Butt瘤細胞;RAJI枸櫞酸托瑞米芬Toremifene 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

MFC細胞，細胞 綠色熒光蛋白標記細胞,MGC803-GFP細胞 恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]枸櫞酸托瑞米芬Toremifene 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

大鼠細胞;GH3枸櫞酸托瑞米芬（標準品）Toremifene 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
恒河猴皮膚細胞;RM-S1 細胞，LoVo細胞 TE-1(細胞)3,5-二甲氧基芐溴(>96.0%(GC))3,5-Dimethoxybenzyl Bromide質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)

癌細胞;MCF 7B3,5-二溴-1-三甲基硅基苯(>97.0%(GC))3,5-Dibromo-1-trimethylsilylbenzene質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)

CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 細胞裂解液 (陽性對照) 3,5-二水楊酸鋰(>98%，BC)Lithium 3,5-diiodosalicylate質(zhì)量規(guī)格：>98%，BC

恒河猴腎細胞;RM-1無水溴化鋰(>98%,BR)Lithium bromide質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

AMPK Others Human  AMPK (G1/B2/A1) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 偏1酸鋰(>98%,BR)Lithium metaphosphate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
禽正呼腸孤病毒RT-PCR試劑盒主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR