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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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鴨病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BK-P64740
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2021-01-15
  • 更新日期: 2024-12-27
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-P64740
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口



公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)赭曲霉   綠色木霉=木素木霉
蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種Bacillusthuringeinsissubsp.thuringeinsis   魯氏酵母  甜醬酵母
銅綠假單胞菌ATCC27853凍干粉   魯氏酵母  醬油酵母
出芽短梗霉   羅斯酵母
煙酸芽孢桿菌   蘇云金芽胞桿菌云南亞種Bacillusthuringiensissubsp.yunnanensis
長(zhǎng)野解普魯蘭桿菌   紫晶口磨
(薩氏曲霉)
驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl
引物110pM
2 μl
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl
ddH2O 50 μl

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

鴨病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

50

BK-P64740

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
鴨病毒染料法熒光定量PCR試劑盒5.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2四環(huán)素鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:Tetracycline HC1,級(jí)別:BR,96-100%,規(guī)格:100毫克

HGF Others Human 人 HGF / Hepatocyte Growth Factor CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氘代本并[A] 98 ATOM % D BqNZO[c]PYRqNq-D12 63466-71-7

人食道平滑肌細(xì)胞裂解物HESMCL癌散,英文名或英文縮寫:8-Azaguanine,級(jí)別:USP級(jí),95%,規(guī)格:5毫克

水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7) T細(xì)胞細(xì)胞,Jurkat,Clone E6-1細(xì)胞 MPC-83細(xì)胞,小鼠*腺泡細(xì)胞癌細(xì)胞γ,γ-聯(lián),英文名或英文縮寫:4,4'-Bipyridine,級(jí)別:AR99%,規(guī)格:1

人肝永生化細(xì)胞;THLE-3MOPS 25g/100g/500g/1Kg原裝 Amresco 0670
腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)纖維素酶(酶活>45 U/mg)Cellulase質(zhì)量規(guī)格:酶活>45 U/mgBC

3T6swiss細(xì)胞,小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 癌細(xì)胞,M453細(xì)胞 谷胱甘肽過氧化物酶分析試劑盒GPXDL-脯氨酸DL-Proline質(zhì)量規(guī)格:0.99

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1DL-丙氨酸甲酯鹽酸鹽DL-Alanine methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:0.98

IL13RA2 Others Human  IL13RA2 / IL13R 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-谷氨酸5乙酯H-Glu(OEt)-OH質(zhì)量規(guī)格:0.985

牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)N-乙酰-DL-亮氨酸N-Acetyl-DL-leucine 質(zhì)量規(guī)格:0.98
原代內(nèi)皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml銅片Copper sheet質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,厚度0.1-0.2cm

HT1080細(xì)胞,纖維細(xì)胞 細(xì)胞,HCE1細(xì)胞 表皮色素細(xì)胞-中色素總RNAHEM-m NA氯化亞銅(>97%,BR)Copper(I) chloride質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR

非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+化亞銅(>99%,BR)Copper (I) iodide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

FGFR4 Others Human  FGFR4 / FGF Receptor 4 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2'-脫氧鳥苷5'1酸二鈉鹽dGDP, 2'-Deoxyguanosine-5'-Diphosphate di salt質(zhì)量規(guī)格:>97%,分子生物學(xué)級(jí)

小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));LA1-VAP33-GFPD-葡萄糖醛酸鈉(> 98%,BR)D-Glucuronic acid,  salt, monohydrate質(zhì)量規(guī)格:> 98%,BR
SPC-A-1細(xì)胞, 人細(xì)胞,HB細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠(B);P19-CAG-tTA-1D3二甲基亞砜(Standard for GC,99.95%(GC))Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,99.95%(GC)

雜交瘤(B);IB3C10H12A12G2H8F3正癸醇(Standard for GC,99.5%(GC))n-Decyl alcohol質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,99.5%(GC)

PVRL2 Others Mouse 小鼠 CD112 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 琥珀酸二乙酯(standard for GC,99.6%(GC))Diethyl succinate質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,99.6%(GC)

人腦微內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HBMECL癸二酸二乙酯(Standard for GC, 99.5% (GC))Diethyl sebacate質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, 99.5% (GC)

CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二十二烷(standard for GC,99.0%(GC))Docosane質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,99.0%(GC)



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