|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BK-P64649 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
|
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
|
人病毒6型PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64649 |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
5-8F, 人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系 Human絡(luò)塞維（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Rosavin
ANGPT2 Others Human 人 ANG2 / Angiopoietin-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 落新婦苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Astilbin
星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基ACM馬錢(qián)苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Loganin
CD164 Others Human 人 CD164 / Endolyn 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 馬錢(qián)苷酸(標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Loganic acid
GPS5 豚鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞羅漢果皂苷Ⅲe質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品mogroside
III e
間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化生長(zhǎng)添加物MODS杯[6]芳烴(>95.0%(HPLC))Calix[6]arene質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)
IL13RA1 Others Rat 大鼠 IL13RA1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-叔丁基杯[6]芳烴(含5-10%的苯)(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[6]arene (contains 5-10% Benzene)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)
牙周膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4-叔丁基-1-(乙氧羰基甲氧基)硫雜杯[4]芳烴(>94.0%(HPLC))4-tert-Butyl-1-(ethoxycarbonylmethoxy)thiacalix[4]arene質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(HPLC)
T6-Swiss albino細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 B16(小鼠色素瘤細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-14-叔丁基磺酰杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylsulfonylcalix[4]arene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)
EFNA3 Protein Human 重組 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白4-磺酸基硫雜[4]芳烴鈉鹽(>98.0%(HPLC))4-Sulfothiacalix[4]arene Salt質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)
輸尿管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯 Boc-Asp(OtBu)-OH質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
CREB3L1 Others Human CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) BOC-D-脯氨酸Boc-D-Pro-OH質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTEBOC-L-絲氨酸甲酯Boc-Ser-OMe質(zhì)量規(guī)格：BR
PG49細(xì)胞，系 轉(zhuǎn)S9基因倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,ZA1細(xì)胞 CL-0042BxPC-3(原位*腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N-BOC-O-芐基-L-絲氨酸N-BOC-O-Benzyl-L-serine質(zhì)量規(guī)格：0.98
SVEC4-10(小鼠結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2BOC-L-蘇氨酸Boc-Thr-OH質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞RNAHSkMSC miRNA5 μg5′-鳥(niǎo)苷酸二鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：5′-GMP，2Na，級(jí)別：高，97%，規(guī)格：500u
BACE2 Others Mouse 小鼠 BACE2 / Beta secretase 2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 隊(duì)二本二聚體 [2.2]Pcrccyclophcnq 1633--3
人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL硅化 McgnqsiuM silicidq, 99.99% 831-39-6
S-180細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 THP-1(單核細(xì)胞) 人細(xì)胞;C-33AAzometxine-Hmonowo7iumsalthydrate水人病毒6型PCR試劑盒合偶氮甲基-H一鈉鹽25克AR，44%
集落刺激因子106-47-84-錄本胺4-CHLOROANILINE PESTANAL
