產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P64721 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
豬托克特諾病毒(豬細環(huán)病毒)染料法熒光定量PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64721 |
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
IFNB1 Others Human 人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB CHO細胞裂解液 (陽性對照) S-乙酰丁二1shēng huà shì jì容量:100毫克
人肝竇內(nèi)皮細胞裂解物HHSECL二二醇單迷 2(2-qthoxyqthoxy)qthcnol 111-90-0
小香豬皮膚細胞;SSC-S2 組織細胞瘤細胞,U-937細胞 NUTU-19細胞,大鼠細胞株嶙酸shēng huà shì jì容量:100克
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細胞;hFOB 1.19L-鳥酸乙酯鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:1公斤
HA Others H1N3 甲型 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1
(Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
2079-89-23-基富馬酸鹽3-AMINOPROPIOnitnILE FUMARATE
導管瘤細胞;BT-4742,2'-二羥基偶氮苯(>98.0%(T))2,2'-Dihydroxyazobenzene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) S-乙酰半胱氨酸鹽酸S-Acetamidomethyl-L-cysteine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CM-R022大鼠甲狀腺上皮細胞完全培養(yǎng)基100mLO-叔丁基-L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽O-tert-Butyl-L-threonine methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:0.98
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞細胞 牛腎細胞,MDBK細胞 Hs 578Bst(成纖維細胞)L-丙氨酸異丙酯鹽酸鹽L-Alanine isopropyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%
小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1L-天冬酰胺甲酯鹽酸鹽Methyl L-asparaginate mono質(zhì)量規(guī)格:0.98
*微內(nèi)皮細胞cDNAHCMEC cDNA溴化膽,從牛脂來(>98.0%(T))Cholesteryl Bromide from Beef Fat質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
SLPI Others Human SLPI 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 膽壬酸酯(>89.0%(GC))Cholesterol Pelargonate質(zhì)量規(guī)格:>89.0%(GC)
大鼠小腸隱窩上皮細胞;IEC-6膽壬基碳酸酯Cholesterol Nonyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格:
95-D細胞,高轉(zhuǎn)移細胞 細胞,M2e細胞 正常大鼠腎細胞;NRK膽庚基碳酸酯Cholesterol Heptyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格:
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2膽油醇碳酸酯(>70.0%(HPLC))Cholesterol Oleyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格:>70.0%(HPLC)
RWPE-2(人正常細胞) 5×106cells/瓶×2法莫替丁相關化合物BFamotidine Related Compound B質(zhì)量規(guī)格:美國進口
HBZY-1(大鼠腎小球系膜細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠*瘤細胞)5×106cells/瓶×2 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1非那西丁-乙氧基-2-13CPhenacetin-ethoxy-2-13C質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人尿道上皮細胞RNAHUC miRNA5 μg非那西丁-乙氧基-1-13CPhenacetin-ethoxy-1-13C質(zhì)量規(guī)格:美國進口
FLT3LG Others Mouse 小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟西汀Fluoxetine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
豬托克特諾病毒(豬細環(huán)病毒)染料法熒光定量PCR試劑盒人主動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL元鹽酸氟西汀Meta Fluoxetine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口