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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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S17-1 感受態(tài)細胞
起訂量 (瓶)價格
1-102350 /瓶
≥101250 /瓶
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-G63259
  • 發(fā)布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2024-12-27
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63259
用途 產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 100ul*10 100ul*50
純度 %
是否進口

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

規(guī)格參數(shù):

產品名稱:S17-1 感受態(tài)細胞
規(guī)格 :100ul*10 100ul*50
分類:克隆感受態(tài)細胞
用途:生化試劑(用于科研試驗研究)
儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
單位: 袋

注意事項:


1. 感受態(tài)細胞*在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態(tài)細胞,用含目的片段的T載體質粒轉化(陽性對照)能長出密密麻麻的菌落,而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化,卻一個菌都沒長出來,重復了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細胞的制作不過關,還是連接出了問題?哪個可能性大些?
答:應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態(tài)細胞放到-80冰箱了有半年了,還能用來轉化質粒嗎?
答:如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況,是可以用來轉化的,但是由于凍存時間過長,轉化效率會有所下降,如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的,如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細胞。

仲辛醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))2-Octanol質量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)  人抗型肝炎病毒抗體(ai-HCV)試劑盒 Human ai-hepatitis C virus(HCV)aibody ELISA Kit  人緊張素轉化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

二十八烷(standard for GC,≥98.5%(GC))Octacosane質量規(guī)格:standard for GC,≥98.5%(GC)  rabbitTissuefactor,TFELISAKit兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  豬神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒 Pig glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit

草酸(Standard for GC,≥99.6%)Oxalic acid dihydrate質量規(guī)格:Standard for GC,≥99.6%  載玻片細胞CYP1A2蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20  HumanN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

正十五烷(標準品)N-PENTADECANE質量規(guī)格:內標  Humanβcatenin,β-CatELISA試劑盒人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  HumanmammarycarcinomaMarker-CA153ELISA試劑盒人癌標志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

貓細小病毒抗體(FPV)ELISA檢測試劑盒Felisparvovirus,FPVELISAKit 96T/48T  539-86-6大蒜素品牌  Allicin

犬血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)試劑盒 Canine serum amyloid A2,SAA2 ELISA Kit  55481-88-4大葉茜草素規(guī)格  Rubimaillin

英文名稱MouseAILR3ELISAKIT小鼠AILR3規(guī)格:96T/48T  122021-74-3丹參酚酸B甲酯  Monomethyl lithospermate B  

腸胃活檢螺旋桿菌(H.PYLORI)吉姆薩(GIEMSA)染色試劑盒50  22681-72-7丹參素說明書  Danshensu

RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISA試劑盒大鼠GATA結合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  67920-52-9丹參素鈉品牌   Danshensu

74285-86-2雷酚內酯品牌  Triptophenolide    組織1酸二酯酶2(PDE2)活性熒光定量檢測試劑盒10

74285-86-2雷酚內酯品牌  Triptophenolide   組織1酸二酯酶2(PDE2)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒10

73-31-4褪黑素說明書  Melatonin  組織1酸二酯酶1(PDE1)活性熒光定量檢測試劑盒10

73069-14-4白術內酯品牌  2-Atractylenolide   組化染色操作20樣本

73-03-0蟲草素說明書  cordycepin   組分氧化應激活性氧(ROS)魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒50

S17-1 感受態(tài)細胞操作方法:

1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

聯(lián)系方式
手機:13564080845