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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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BL21 Star(DE3) 感受態(tài)細胞
起訂量 (瓶)價格
1-10￥2350 /瓶
≥10￥1250 /瓶
  • 品牌：帛科
  • 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
  • 貨號：BK-G63270
  • 發(fā)布日期： 2021-02-21
  • 更新日期： 2024-12-27
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63270
用途 產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細胞 否
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 100ul*10 100ul*50
純度 %
是否進口 是
規(guī)格參數(shù)：

產(chǎn)品名稱：BL21 Star(DE3) 感受態(tài)細胞
規(guī)格 ：100ul*10 100ul*50
分類：表達感受態(tài)細胞
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀） 干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
1. 感受態(tài)細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態(tài)細胞，用含目的片段的T載體質粒轉化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接產(chǎn)物轉化，卻一個菌都沒長出來，重復了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細胞的制作不過關，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照，確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態(tài)細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉化質粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況，是可以用來轉化的，但是由于凍存時間過長，轉化效率會有所下降，如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細胞。
操作方法：
1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產(chǎn)物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

脂酰布洛芬-β-D-葡萄糖苷酸質量規(guī)格：美國進口Ibuprofen Acyl-β-D-glucuronide   大鼠角化細胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA檢測試劑盒Ratkeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit 96T/48T  Humangranulocytechemotacticprotein-2,GCP-2ELISA試劑盒人粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

外消旋2-羥基布洛芬質量規(guī)格：美國進口rac 2-Hydroxy Ibuprofen  人SHC轉化蛋白1(SHC1)試劑盒 Human SHC1 ELISA Kit  HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISAKit人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1-羥基布洛芬(布洛芬雜質))(非對映)質量規(guī)格：美國進口1-Hydroxy Ibuprofen (Ibuprofen Impurity L)(Mixture of Diastereomers)  英文名稱MouseVIII-AgELISAKit小鼠凝血因子VIII相關抗原(VIII-Ag)規(guī)格：96T/48T  大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA試劑盒 ，英文名： REG-1a ELISA Kit

1-含氧的布洛芬質量規(guī)格：美國進口1-Oxo Ibuprofen  VZV(VARICELLAZOSTER)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2  人酶(CA)ELISA檢測試劑盒Humancarbonicanhydrase,CAELISAKit 96T/48T

犬緊張素1-7(Ang1-7)試劑盒 Dog angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA kit  502-65-8番茄紅素說明書  lycopene

英文名稱HumaissuefactorpathwayinhibitorELISAKit人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  81-27-6番瀉苷A品牌  Sennoside A

超敏型ECL印跡化學發(fā)光溶液A液：100毫升B液：500微升1000cm2  128-57-4番瀉苷B規(guī)格  Sennoside B

Ratglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISA試劑盒大鼠糖皮質激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  37271-16-2番瀉苷C  Sennoside C

小鼠轉錄激活因子6(ATF6)ELISA試劑盒 ，英文名： ATF6 ELISA Kit  37271-17-3番瀉苷D說明書  Sennoside D

6537-80-0菊苣酸品牌  Cichoric Acid   組蛋白H3-K18(mono)甲基化檢測試劑盒10/20等

65-19-0鹽酸育亨賓品牌   Yohimbine   組蛋白H3-K14乙?；瘷z測試劑盒10/20等

BL21 Star(DE3) 感受態(tài)細胞64-86-8秋水仙堿說明書    Colchicine  組蛋白H3-K122(mono)甲基化檢測試劑盒10/20等

64849-39-4甜葉懸鉤子苷說明書  Rubusoside  組蛋白H2B-K5乙?；瘷z測試劑盒10/20等

64849-39-4甜茶苷說明書  Rubusoside   組蛋白H2B-K46乙?；瘷z測試劑盒10/20等

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