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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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LBA4404 電擊感受態(tài)細胞
起訂量 (瓶)價格
1-10￥2350 /瓶
≥10￥1250 /瓶
  • 品牌：帛科
  • 產地：進口、國產
  • 貨號：BK-G63309
  • 發(fā)布日期： 2021-02-21
  • 更新日期： 2024-12-27
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63309
用途 產品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細胞 否
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 50ul*10 50ul*50
純度 %
是否進口 是
規(guī)格參數：

產品名稱：LBA4404 電擊感受態(tài)細胞
規(guī)格 ：50ul*10 50ul*50
分類：根癌農桿菌感受態(tài)細胞  
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀） 干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
1. 感受態(tài)細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態(tài)細胞，用含目的片段的T載體質粒轉化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化，卻一個菌都沒長出來，重復了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細胞的制作不過關，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照，確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態(tài)細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉化質粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況，是可以用來轉化的，但是由于凍存時間過長，轉化效率會有所下降，如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細胞。
操作方法：
1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

鈉(>95%,BR)質量規(guī)格：>95%,BR laurate  英文名稱MouseiFABPELISAKit小鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)規(guī)格：96T/48T  大鼠(A1C)ELISA試劑盒 ，英文名： A1C ELISA Kit

吡嗪(>98.0%(GC))質量規(guī)格：>98.0%(GC)Pyrazine  冰凍切片氧化應激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(過氧亞硝基陰離子)20  人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA檢測試劑盒HumanSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 96T/48T

2,3-吡嗪二羧酸(>98.0%(HPLC)(T))質量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)2,3-Pyrazinedicarboxylic Acid  Ratcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISA試劑盒大鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  驢卵泡刺激素(FSH)試劑盒 Donkey Follicle-Stimulating Hormone,FSH ELISA Kit

茴香偶酰(>98.0%(GC))質量規(guī)格：>98.0%(GC)p-Anisil  小鼠5核苷酸酶(5-)ELISA試劑盒 ，英文名： 5- ELISA Kit  CLIAKitforProGRP(Humanpro-gasin-releasingpeptide)ELISAKit人胃泌素釋放肽前體規(guī)格：48T/96T

Ratheatshockprotein20,hSP-20ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  毛冬青皂苷B3  ilexsaponin B3

小鼠受體超家族成員4(TNFRSF4)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFRSF4 ELISA Kit  110026-03-4?；秦i去氧膽酸說明書   Taurohyodeoxycholic acid  salt hydrate

犬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測試劑盒Canineacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 96T/48T  140369-76-2異型南五味子丁素品牌  Heteroclitin D

犬視黃醇結合蛋白4(RBP-4)試劑盒 Canine Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit  125675-09-4苦蒿素規(guī)格  Blinin

英文名稱HumanLaminaPropriaLymphocyteELISAKit人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  486-62-4芒柄花苷  Ononin

519-02-8苦參堿規(guī)格  Matrine  植物總氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒20

518-82-1大黃素說明書  Emodin   植物總RNA化試劑盒(高多糖/酚)20

518-69-4延胡索甲素說明書  （+）- Corydaline   植物總RNA化試劑盒(低多糖/酚)20

518-69-4延胡索甲素品牌  Corydaline  植物種子甲磺酸乙脂突變誘導試劑盒3

LBA4404 電擊感受態(tài)細胞518-34-3粉防己堿  Tetrandrine   植物種子活性葉綠體分離試劑盒20

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