Ach 大鼠乙酰膽堿ELISA檢測試劑盒試劑配制：

1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。

2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。在正式進(jìn)行Ach大鼠乙酰膽堿ELISA檢測前，還需進(jìn)行以下關(guān)鍵步驟以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和靈敏度：

11、洗滌液配制：將濃洗滌液按照1:25的比例與蒸餾水混合均勻，確保每孔洗滌時(shí)能有足夠的洗滌液覆蓋并徹底去除未結(jié)合的殘留物，此步驟對(duì)于減少背景噪音至關(guān)重要。

12、標(biāo)準(zhǔn)品系列稀釋：將兩瓶凍干標(biāo)準(zhǔn)品分別溶解于指定體積的樣品稀釋液中，并按照說明書的推薦濃度梯度進(jìn)行系列稀釋，以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，便于后續(xù)樣本結(jié)果的定量分析。

13、抗體工作液準(zhǔn)備：取適量生物素標(biāo)記抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素，分別用其對(duì)應(yīng)的稀釋液按照1:100的比例稀釋至工作濃度，輕柔混勻，避免產(chǎn)生氣泡，影響加樣精度。

14、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：將所有試劑（包括已稀釋的洗滌液、標(biāo)準(zhǔn)品系列、抗體工作液等）預(yù)熱至室溫，確保實(shí)驗(yàn)條件的一致性。同時(shí)，檢查酶聯(lián)板無破損，孔間無污染，為接下來的加樣步驟做好準(zhǔn)備。

至此，Ach大鼠乙酰膽堿ELISA檢測試劑盒的所有試劑配制及準(zhǔn)備工作已完成，接下來即可按照說明書指示的步驟進(jìn)行加樣、孵育、洗滌、顯色及終止反應(yīng)等操作，最終通過酶標(biāo)儀讀取數(shù)據(jù)，進(jìn)行結(jié)果分析。