人小細胞肺癌細胞DMS操作步驟
發(fā)表時間:2024-12-02
人小細胞肺癌細胞DMS(以下簡稱DMS細胞)操作步驟續(xù)接如下:
在完成DMS細胞的復(fù)蘇、培養(yǎng)與傳代等基礎(chǔ)工作后,接下來我們將進行細胞凍存與藥物處理兩大關(guān)鍵步驟。
細胞凍存旨在長期保存細胞活性,以備后續(xù)實驗之需。首先,需配制適量的細胞凍存液,通常包含基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清及二甲基亞砜(DMSO),比例依據(jù)細胞特性調(diào)整。隨后,將處于對數(shù)生長期的DMS細胞進行離心處理,去除舊培養(yǎng)基,加入凍存液重懸。接著,將細胞懸液轉(zhuǎn)移至凍存管中,標(biāo)記好細胞名稱、凍存日期及操作者信息。遵循“慢凍快融”原則,先將凍存管置于4℃冰箱30分鐘,再移至-20℃冰箱2小時,最后轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱或液氮罐中長期保存。
藥物處理環(huán)節(jié),旨在探究特定藥物對DMS細胞生長、增殖及凋亡等生物學(xué)行為的影響。根據(jù)實驗設(shè)計,選取適宜濃度的藥物溶液,加入含有DMS細胞的培養(yǎng)體系中。期間,需密切關(guān)注細胞形態(tài)變化,適時更換含藥培養(yǎng)基,并記錄藥物作用時間。為評估藥物效果,可采用MTT法檢測細胞存活率,流式細胞術(shù)分析細胞周期與凋亡情況,或通過Western Blotting等技術(shù)檢測相關(guān)蛋白表達水平。
通過上述細致而嚴(yán)謹?shù)牟僮鞑襟E,我們得以深入探索DMS細胞的生物學(xué)特性及其響應(yīng)藥物干預(yù)的分子機制,為肺癌的精準(zhǔn)治療提供有力支持。